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保证ELISA试剂盒实验结果的几大基础
更新【xīn】时【shí】间:2024-9-21   点击次数:737次【cì】

根据前面说到的ELISA试剂盒质量控【kòng】制中我【wǒ】们知道,由ELISA的性质和来源,分为可测【cè】误差、随机误差【chà】、人【rén】为误【wù】差【chà】。在ELISA试剂盒实验中,只【zhī】有遵循它应有的规则才能【néng】更好的完成【chéng】实验【yàn】,对此【cǐ】
上海酶联生物特别为您分析了保证实验结果的几大基础:

1.要在实验前1小时【shí】将试【shì】剂盒从【cóng】冰箱【xiāng】中取出,使【shǐ】各种试剂都恢复到室温,以使结果更【gèng】稳定【dìng】。

2.实验时,要使底物避光保存。

3.用枪吸取液体时速度不【bú】能太【tài】快,以免【miǎn】产生气泡而使【shǐ】吸取量不准【zhǔn】确。

4.吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

5.要【yào】保证移液枪的准确性【xìng】,误差不能超过【guò】2%。可【kě】用【yòng】水和电子天平进行确定。但有专【zhuān】业人员进行矫正。

6.要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪【qiāng】各一【yī】支【zhī】。吸【xī】取不同的液体后【hòu】,要【yào】更换枪头。即使是吸取标准品时【shí】。

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再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载【zǎi】体上。此时固相上的【de】酶量与标本中【zhōng】受检【jiǎn】物【wù】质的量【liàng】呈一【yī】定【dìng】的比例。加入酶反【fǎn】应的底物后,底物被【bèi】酶【méi】催化成【chéng】为有【yǒu】色【sè】产物,产【chǎn】物的量与标本中受检【jiǎn】物质的量直接相关【guān】,故可【kě】根据【jù】呈色的深浅进行定性【xìng】或定量分【fèn】析。
在操作步骤中,还有这几个必知项目:

1. 温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。

2. 将【jiāng】液体加【jiā】到酶标孔中时,避免枪头和孔内液【yè】体接触,可【kě】使枪头【tóu】上的【de】液滴和孔壁接触,液【yè】滴会自【zì】然流下去。

3. 洗板【bǎn】时,每次洗液加入后,应静置【zhì】1分钟【zhōng】,使清洗更【gèng】加*。没【méi】有洗板机时,倒去【qù】液体后,要将酶标板在【zài】报【bào】纸【zhǐ】或毛纸上用力拍干【gàn】。

4. 洗液不够时,可用蒸馏水【shuǐ】自行配制PH7.4,0.02M的磷【lín】酸【suān】缓冲【chōng】液,加入0.1%的吐【tǔ】温6作为【wéi】洗液【yè】。加【jiā】入1/1000的叠氮钠【nà】后可长期保存。

5. ELISA试剂盒实验【yàn】中【zhōng】,液体全部加完后,可将酶标【biāo】板【bǎn】在桌子上平行轻【qīng】轻晃动30秒,混匀液体。也【yě】可以【yǐ】用酶标仪的【de】晃动功能。

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