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目前，分子【zǐ】生【shēng】物学正【zhèng】在并终肯定会让我们对整个生命科学【xué】有【yǒu】一个全面而*的认识，其对【duì】免疫测定技术【shù】发展【zhǎn】的影响也是直接【jiē】而又有效【xiào】的，它使我们对以【yǐ】前一些难【nán】以检【jiǎn】测的生物活性物质【zhì】的测【cè】定变得轻【qīng】而【ér】易举【jǔ】，并【bìng】且大大提高了检测【cè】的灵敏度和特异性。

较早用于免疫【yì】测定【dìng】的基因工【gōng】程【chéng】抗【kàng】原是HBcAg和【hé】HBsAg，这两种基【jī】因【yīn】工程【chéng】抗原的出现，较【jiào】好地【dì】解决了抗HBc和HBe的测定问题。因为要从病毒本身去大量获【huò】取这两种纯抗原较为【wéi】困难，并且【qiě】这一点对于难培养的病原微生物【wù】来【lái】说，如HIV、HCV和梅毒螺旋体【tǐ】等都有些共性。

 一、ELISA 

  HCV目前尚【shàng】不能体【tǐ】外培养，只【zhī】能用基因工程或化学合成【chéng】方法【fǎ】获取HCV结构【gòu】和【hé】非结构区的各种抗原片【piàn】断，已知【zhī】HCV基因组【zǔ】有7个功能区【qū】组成：核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5（有分为NS5a和NS5b）区【qū】，合【hé】成抗【kàng】原的【de】优点【diǎn】是易【yì】于纯化，特异性好，抗原抗【kàng】体反应强。

二、代抗HCV-ELISA

由美国ortho公司克【kè】隆C1003抗原【yuán】几个片断与人超氧化物歧化【huà】酶（SOD）结合。用酵母从病【bìng】毒【dú】基因组【zǔ】非【fēi】结合区得到表达，表达为融合蛋白，亦【yì】作为包被固相载体【tǐ】。

抗【kàng】原组合：NS4 区【qū】二个基因片断【duàn】为【wéi】NS 9-21-1和C1003

特性：IgG抗C100在发病【bìng】后数月后，才【cái】检【jiǎn】出，故不【bú】宜作早期诊断。

约由20%的病人不出【chū】现抗体。IgM抗【kàng】-C100急【jí】性【xìng】期检出【chū】率只有64%。

C100的抗【kàng】原性【xìng】较弱，在HCV复制中，不能充分暴露宿主【zhǔ】的【de】免疫系【xì】统。

特异性和灵敏性较差。

三、第二代HCV-ELISA试剂盒

 用基因重【chóng】组【zǔ】的HCV结构蛋白与【yǔ】非结构【gòu】蛋白抗原包被固相载体【tǐ】。

抗【kàng】原组合：核心区（C区）多肽【tài】C22  NS区多肽C33  C1003和【hé】NS 9-21-1

增加C22区【qū】和C33区【qū】后【hòu】，抗体出现早，有助早期诊断，提高阳【yáng】性率。有【yǒu】利早期诊断。

C22是早期易出现病毒血症

四、第四代HCV-ELISA 试剂盒

美【měi】国新近推【tuī】出一种包括HCV基因组【zǔ】7个功【gōng】能【néng】区所有免疫决【jué】定基的单一【yī】融合蛋白，称【chēng】为多决【jué】定基【jī】融【róng】合抗原，采用表面活性【xìng】剂处理分【fèn】界病毒表【biǎo】面复【fù】合物，释放HCV核心抗原      （core）并用ELISA法，灵敏度可达500拷贝【bèi】/ml，已接近核酸扩增检测水平。

 抗原组合：以Core和NS3作为主要检【jiǎn】测片【piàn】断（比例十分重要）加合成多肽【tài】NS4

 特点：

① 直接测Core抗原；

②不易发生变异；

③ 抗IgM 和IgG检出率可达100%；

④ 特异性达99。8%灵敏度为100%。

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