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上海酶联浅谈如何区分双抗夹心法、间接法和竞争法
更新时间【jiān】:2024-9-21   点击次数:1892次

近年来【lái】,ELISA试剂盒【hé】以灵【líng】敏度较高、特异性较好的特点得【dé】到了广泛的应用,ELISA试【shì】剂盒【hé】根据【jù】试剂的【de】来源和标【biāo】本的情况以及检测的具体条件,又分【fèn】为双抗夹心法、间接法、竞争【zhēng】法【fǎ】等【děng】几种类型【xíng】。


那么【me】,这几种类型分别应用于哪些【xiē】实【shí】验?这些类型【xíng】的优缺点又是什么呢?请继续往下【xià】看【kàn】!

双抗体夹心法测抗原:双抗体夹心法是检测抗原常用的方法,适用于【yú】测定二价或二价以上的【de】大分子抗原【yuán】,但不适用于【yú】测定半抗【kàng】原及【jí】小分子单价抗【kàng】原,因其【qí】不能形成两位点【diǎn】夹心【xīn】。


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双抗原夹心【xīn】法测抗【kàng】体:反应模式与双【shuāng】抗体夹【jiá】心【xīn】法类似。用【yòng】特【tè】异性【xìng】抗原进行包被【bèi】和制备酶结【jié】合物【wù】,以【yǐ】检【jiǎn】测相应的【de】抗体。与间接法测抗体的不同之处为【wéi】以酶标抗原代【dài】替酶标抗【kàng】抗体【tǐ】。此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其【qí】敏感度相【xiàng】对【duì】高于间接法。乙肝标志物【wù】中抗HBs的检测常【cháng】采用本【běn】法。本法关键在于【yú】酶标抗原的制备,应根据抗原结构的【de】不同,寻找合适的标记方法。


间接法:是检测抗体常用的方【fāng】法,本法主要用于【yú】对病原体抗体的检测而进【jìn】行传染病的【de】诊【zhěn】断【duàn】。 

竞争法测抗【kàng】体:当抗原【yuán】材料中的干扰【rǎo】物质不易除去【qù】,或不易得到【dào】足够【gòu】的纯化抗原时,可用此【cǐ】法检测特异【yì】性抗体【tǐ】。其原理【lǐ】为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相【xiàng】抗原结合。抗HBe的检【jiǎn】测一般【bān】采用【yòng】此法。 


竞争【zhēng】法测抗【kàng】原:小分【fèn】子抗原或半【bàn】抗原因【yīn】缺乏可作夹心【xīn】法的【de】两个以上【shàng】的位点,因此不能用双抗体夹心【xīn】法进行测【cè】定,可【kě】以采用竞争【zhēng】法模式。其原理是标【biāo】本中的【de】抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原【yuán】量【liàng】含量愈多【duō】,结【jié】合【hé】在【zài】固相上的酶标抗【kàng】原愈少,后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测【cè】定【dìng】多用此法。


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