酶联【lián】生物【wù】免疫学检验的各领域中【zhōng】的ELISA试剂盒，有【yǒu】着灵敏度高、特异性强【qiáng】、经济性较好等优点【diǎn】，酶联生物【wù】的【de】ELISA试剂盒在所【suǒ】有产【chǎn】品中销量【liàng】是高的，本公【gōng】司ELISA试剂盒仅用于科【kē】研，不用于临床。在实验过【guò】程【chéng】中肯【kěn】定会有很多科【kē】研【yán】朋【péng】友是不懂【dǒng】的，今天就给大家介绍一下ELISA试剂盒【hé】的使用方法。

一：实验操作程序简述

1. 准备试剂，样品和标准品；

2. 加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟；

3. 洗板5次，加入显色液A、B，37℃反应10分钟；

4. 加入终止液；

5. 15分钟之内度OD值；

二：包被的条件

包被用【yòng】抗原或抗体的浓度【dù】，包被【bèi】的温【wēn】度【dù】和时【shí】间【jiān】，包【bāo】被液的pH等应根据【jù】试验的特点和材料的性质而选定。ELISA试【shì】剂盒抗体和蛋白质抗原一般采用【yòng】pH9.6的碳酸盐缓冲液作为【wéi】稀释液【yè】，也【yě】有用【yòng】pH7.2的【de】磷酸盐缓冲液及【jí】pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀【xī】释液【yè】的。

通常在ELISA板【bǎn】孔中【zhōng】加入包被液后，在【zài】9-21℃冰箱【xiāng】中放【fàng】置【zhì】放置一个晚上，37℃中保温2小时【shí】被认为具有同等的【de】包被效果。包被的适当浓【nóng】度随载体【tǐ】和【hé】包【bāo】被【bèi】物【wù】的性质可有【yǒu】很大的变化【huà】，每批材料需通过实验与【yǔ】酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质【zhì】的包被浓度为【wéi】100ng/ml-20ug/ml。

三：竞争法测抗原

小分子抗原或半抗原因【yīn】缺乏可【kě】作夹心法的两个以上的位【wèi】点【diǎn】，因此【cǐ】不能用【yòng】双抗体夹心法进【jìn】行测定，可以采用竞争法模式【shì】。其原理【lǐ】是【shì】标本【běn】中的抗原【yuán】和一定量的【de】酶标抗【kàng】原【yuán】竞争与【yǔ】固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在【zài】固相上的【de】酶标抗原愈【yù】少，zui后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。

四：抗原和抗体

制备结合物时所用抗体一般 均为纯度较高的IgG，以免在与酶联结时其他杂蛋【dàn】白的【de】干扰。用亲【qīn】和层析【xī】纯的抗体【tǐ】，这样全部酶结【jié】合物均具有【yǒu】特【tè】异的免疫活性，可以在高稀释度进【jìn】行反【fǎn】应，实验结果本底浅淡。如用F(ab')2进行【háng】标记，则更可【kě】避免标【biāo】本中RF的干【gàn】扰。

酶联生物提供的ELISA试剂盒，让您赢在起步！公司主营：ELISA试剂盒,人ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,生物试剂,血清【qīng】,抗体【tǐ】,培养基【jī】,标准品,国产【chǎn】血清、胎牛血清等。有需【xū】要的科研朋友们【men】，咨询订购哦！