小鼠 CollagenIV （酶联免疫检测法）

名  称：  小鼠 CollagenIV（酶联免疫检测法）

英　文： CollagenIV ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期【qī】应用【yòng】：ELISA法定量测定血清【qīng】、血浆、细胞【bāo】培养上清或其它【tā】相【xiàng】关生物液体中BAP含【hán】量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不用的板条应立即【jí】放回包装【zhuāng】袋中，密封【fēng】保存，以免【miǎn】变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终止液和底物【wù】A、B液时，避免【miǎn】使用带金【jīn】属部【bù】分【fèn】的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标【biāo】准品：标准【zhǔn】品的系列稀释应【yīng】在【zài】实验时准备，不能储存【cún】，稀释【shì】前将标准品振荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测样品数量加上标准【zhǔn】品的数量决【jué】定所需【xū】的【de】板条数，每【měi】个【gè】标准品和空【kōng】白孔【kǒng】建议做复孔。

5)每【měi】个样【yàng】品根据【jù】自己【jǐ】的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔，标本用标本稀释液【yè】1:1稀释【shì】后加入50ul于反应【yīng】孔内。

6)加入稀释好【hǎo】后的标准品50ul于反应孔、加入【rù】待【dài】测样品50ul于反应孔【kǒng】内【nèi】。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液【yè】体，每孔【kǒng】加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液【yè】，用吸【xī】水纸【zhǐ】拍【pāi】干【gàn】，重复此操作3次【cì】。

9)每【měi】孔加入80ul的亲和链【liàn】酶【méi】素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温【wēn】育30分钟。

10)甩【shuǎi】去孔内液体，每孔加【jiā】满【mǎn】洗【xǐ】涤液，振荡【dàng】30秒【miǎo】，甩去洗涤液【yè】，用吸水纸拍干。重复此操作3次。

11)每孔加【jiā】入底【dǐ】物A、B各【gè】50ul，轻轻振荡混匀【yún】，37℃温育10分【fèn】钟，避免【miǎn】光照。

12)取出酶标板【bǎn】，迅【xùn】速加入【rù】50ul终止液，加入终止液后应【yīng】立【lì】即测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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