随着分子生物学和细胞生【shēng】物【wù】学研究的不断发展【zhǎn】，转染已【yǐ】经【jīng】成为研【yán】究和控制【zhì】真核细【xì】胞基因功【gōng】能的常规工具。细胞转染实验是现代生物学研【yán】究中的重要技术手段之一。通【tōng】过将外源DNA、RNA、蛋【dàn】白质【zhì】等引入目标细胞的实验技术之一，研【yán】究者【zhě】们【men】可以揭【jiē】示细【xì】胞的【de】基【jī】因功能【néng】、蛋白质表【biǎo】达和【hé】相互作用，进而深入理解细胞生理过【guò】程和疾病发生【shēng】机制。接下来我来【lái】为【wéi】大家介绍【shào】一下常见的细胞转染方法吧

1.化学物质介导：磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法

1）磷酸钙共沉【chén】淀法：借助于形成一种DNA-磷【lín】酸钙【gài】复合物沉淀【diàn】黏附在细胞膜表【biǎo】面【miàn】，通过细【xì】胞【bāo】的内吞作【zuò】用而使DNA被细胞捕获。沉淀【diàn】颗粒的大小和质量对于【yú】转染的成功至【zhì】关重要，也受pH值、钙离子浓度、DNA浓【nóng】度【dù】、沉淀反应时间、细胞【bāo】孵【fū】育时间等因素影响。可适用于稳【wěn】转瞬【shùn】转，操作【zuò】简【jiǎn】便花费相对较低，但转染效率低【dī】，9-21%，并且重复性【xìng】很【hěn】差。

2）脂质体转染【rǎn】：带【dài】正电的脂【zhī】质体【tǐ】与带负电的核酸磷酸基团形成DNA-阳离子脂【zhī】质体复【fù】合物，再与细胞膜上的唾液【yè】酸【suān】残【cán】基的负电【diàn】核结合，可能【néng】经过内吞作【zuò】用被导入细胞。该【gāi】方法使用简单，可携带大片段DNA，通用于各【gè】种类型【xíng】的裸【luǒ】露DNA或RNA，能转【zhuǎn】染各【gè】种【zhǒng】类型的细胞，转【zhuǎn】染效率、转染的【de】稳定性【xìng】和可重复性【xìng】大【dà】大提高。但转染时需要去除血【xuè】清，血清的缺失会【huì】导致细胞毒性增【zēng】加；转染效果也随细胞类型变化大。

2. 物理物质介导：电穿孔法、显微注射

1）电穿孔法：电【diàn】穿孔是【shì】通过高【gāo】强度的电【diàn】场作用破坏细胞膜电位，瞬时提高细胞膜的通透性，从而【ér】吸收【shōu】周围介【jiè】质中的【de】外【wài】源分子【zǐ】。电穿孔法可适用于【yú】所有细胞类型的瞬时【shí】和稳定转染，但是【shì】其高电压脉冲【chōng】导【dǎo】致细【xì】胞致死率非常高，并且对【duì】DNA和细胞【bāo】的用量很大。

2）显微注射：需要使用【yòng】精【jīng】密的仪器【qì】，直接将外源【yuán】性核酸【suān】注射至【zhì】宿主细胞核【hé】内。多【duō】用于【yú】转基因，由宿主基因组序列可能发生的重组，缺失，复制或者异位等现象使【shǐ】外源基因嵌入宿主的染色体中。但是转染细胞【bāo】数【shù】有限,多用【yòng】于工程改造或转基因【yīn】动物的【de】胚胎【tāi】细胞。

3. 生物物质介导：病毒介导法

1）逆转录病毒【dú】(RNA)：通过病【bìng】毒侵染【rǎn】宿主细胞的机制将外【wài】源基因整合到宿主细【xì】胞的染色体中，导致基因失活或激活癌基因，构建稳【wěn】转株。可以【yǐ】用【yòng】于难转染【rǎn】的细胞【bāo】，原代细胞，体内细胞等，但【dàn】携带基因【yīn】不能【néng】太大（<8kb）:,需【xū】考【kǎo】虑安全因素。

2）腺病毒(双链DNA)：腺病【bìng】毒除了卵细【xì】胞以外几乎在所有已知细胞【bāo】中都不整合到染色体中，因此【cǐ】不会干【gàn】扰【rǎo】其它【tā】的宿主基因。瞬时表达，可以包装8kb左右外源基因【yīn】，转染较【jiào】容易，但是【shì】转【zhuǎn】染效率不【bú】高。

细胞转染实验作为一种重要的实验手段，为我们探索细胞内的奥秘提供了【le】有效的工具。根据实验【yàn】需求【qiú】和【hé】细胞特性，选择合适的转【zhuǎn】染方法非常【cháng】重【chóng】要。像【xiàng】细胞状态【tài】和【hé】密度、培养基、载体大小等多方面因素都会影响到我们最后的【de】转染效【xiào】率，所以细胞转染是一个【gè】常【cháng】见【jiàn】但是【shì】却并不简【jiǎn】单【dān】的实验。