大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α) ELISA试剂盒

中文名称：大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α) ELISA试剂盒

保存条件：避光/低温保存

产品品牌：mlbio/酶联生物

产品规格：96T/48T

使用范围：仅限范围内使用

保 质 期：12个月

ELISA检测试剂盒的注意事项：

1、严格按照【zhào】规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所【suǒ】有试【shì】剂都【dōu】必须在使【shǐ】用前达到【dào】室温 9-22℃。使用后【hòu】立即冷藏保存试【shì】剂。

2、洗板不【bú】正确【què】可以导致不准确的结果。在【zài】加入底物【wù】前【qián】确保尽量吸干【gàn】孔内液体。温育过【guò】程中不要让微孔【kǒng】干燥掉。

3、消除板底残留的液体和手指印，否则影响 OD 值。

4、底物显【xiǎn】色液应呈【chéng】无色或很【hěn】浅的颜【yán】色，已经变蓝的底物液不能使用。

5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6、在储存和温育时避免强光直接照射。

7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8、任【rèn】何反【fǎn】应试剂不能接触漂白【bái】溶剂或漂白溶【róng】剂所散发的强烈气体。任何漂白成【chéng】分都【dōu】会破坏试剂盒中反应试剂的【de】生【shēng】物【wù】活性。

9、不能使用过期产品。

10、如果【guǒ】可能传播疾病，所有的样品【pǐn】都【dōu】应管理好，按【àn】照规定的【de】程序处理样品和检测【cè】装置【zhì】。

操作步骤:

1. 从室温平衡【héng】20min后【hòu】的【de】铝箔袋中【zhōng】取出所【suǒ】需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设【shè】置标准品孔和样本【běn】孔，标准品孔【kǒng】各加不同浓【nóng】度的标准品【pǐn】50μL；

3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外【wài】，标【biāo】准品孔和样【yàng】本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用【yòng】封板膜【mó】封住反【fǎn】应孔，37℃水【shuǐ】浴锅或【huò】恒温箱温育60min。

5. 弃去【qù】液体，吸【xī】水纸上拍【pāi】干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液【yè】，吸水【shuǐ】纸上拍干，如此重【chóng】复洗板5次（也可用【yòng】洗板机【jī】洗板）。

6. 每孔加入底物【wù】A、B各50μL，37℃避【bì】光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在【zài】450nm波长处测【cè】定各孔的OD值【zhí】。

除标【biāo】准品外，4℃保存6个月内有效，标准品4℃保存，9-22周内有效，-20℃保【bǎo】存6个月内【nèi】有效，由于标准品一般【bān】是冻干【gàn】粉，在制【zhì】备后需要【yào】严格【gé】校【xiào】准，所【suǒ】以标准品的瓶数及每瓶标【biāo】准品【pǐn】所需加入的【de】稀释【shì】液体积【jī】请以实际收【shōu】到的试【shì】剂盒及标准品标签上的标注【zhù】为【wéi】准。

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