大鼠肿瘤坏死因子-alpha(TNF-alpha)试剂盒

中文名称：大鼠肿瘤坏死因子-alpha(TNF-alpha)试剂盒

保存条件：避光/低温保存

产品品牌：mlbio/酶联生物

产品规格：96T/48T

使用范围：仅限范围内使用

保 质 期：12个月

ELISA检测试剂盒的注意事项：

1、严【yán】格【gé】按照规【guī】定【dìng】的时间和温度进行温育以保证【zhèng】准确结果。所有试剂【jì】都【dōu】必须在使用前达【dá】到室温 9-22℃。使用【yòng】后立即冷藏保存试剂。

2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物【wù】前确保尽量【liàng】吸【xī】干孔内【nèi】液【yè】体。温【wēn】育过程中【zhōng】不要让微孔干燥掉。

3、消除板底残留的液体和手指印，否则影响 OD 值。

4、底【dǐ】物显色【sè】液应【yīng】呈无色【sè】或很浅的颜【yán】色，已经变蓝的【de】底物液不能使用。

5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6、在储存和温育时避免强光直接照射。

7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8、任何【hé】反应试剂不【bú】能接触漂白溶剂【jì】或漂【piāo】白溶剂所散发【fā】的强烈气体。任何漂白【bái】成分【fèn】都会破坏【huài】试剂盒中反应试剂的生物【wù】活性。

9、不能使用过期产品。

10、如果可能传播疾病【bìng】，所有的样品都【dōu】应管【guǎn】理好【hǎo】，按【àn】照【zhào】规定的程【chéng】序【xù】处理样品和检测装置。

操作步骤:

1. 从室温平衡20min后的铝【lǚ】箔袋中【zhōng】取【qǔ】出【chū】所【suǒ】需板条，剩余板条【tiáo】用自封袋密封放【fàng】回4℃。

2. 设【shè】置【zhì】标准【zhǔn】品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓【nóng】度的标准品50μL；

3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样【yàng】本孔【kǒng】中每孔加入【rù】辣根过氧化物【wù】酶（HRP）标记的检测抗【kàng】体100μL，用封板膜封住反【fǎn】应【yīng】孔，37℃水【shuǐ】浴锅或恒温箱【xiāng】温【wēn】育60min。

5. 弃去液体【tǐ】，吸水纸上【shàng】拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩【shuǎi】去【qù】洗涤液，吸水【shuǐ】纸上【shàng】拍干，如【rú】此重复洗【xǐ】板5次（也可【kě】用洗板机洗板【bǎn】）。

6. 每孔加入底物A、B各【gè】50μL，37℃避光孵育【yù】15min。

7. 每【měi】孔加入终止液【yè】50μL，15min内，在450nm波长处【chù】测定各孔的OD值。

除标【biāo】准品【pǐn】外，4℃保存6个月【yuè】内【nèi】有效【xiào】，标准品4℃保存【cún】，9-22周内有效，-20℃保存6个【gè】月内有效，由于【yú】标准品一般是冻干粉，在制备【bèi】后需要严格校准，所以标准品【pǐn】的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释【shì】液【yè】体【tǐ】积【jī】请以【yǐ】实际【jì】收【shōu】到的试剂盒及【jí】标准品标签上的标注【zhù】为准。

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