大鼠肿瘤坏死因子-a(TNF-a) ELISA试剂盒

中文名称：大鼠肿瘤坏死因子-a(TNF-a) ELISA试剂盒

保存条件：避光/低温保存

产品品牌：mlbio/酶联生物

产品规格：96T/48T

使用范围：仅限范围内使用

保 质 期：12个月

ELISA检测试剂盒的注意事项：

1、严格按照规定【dìng】的时间和【hé】温度【dù】进【jìn】行温育以保证准确结果。所【suǒ】有试剂都【dōu】必须在使用【yòng】前达到【dào】室温 9-23℃。使用【yòng】后立即冷藏保存试剂。

2、洗板不正确可【kě】以导致不准确的结【jié】果【guǒ】。在【zài】加入底物前确保尽【jìn】量吸【xī】干孔内液体。温育过【guò】程中不要让微孔干【gàn】燥掉【diào】。

3、消除板底残留的液体和手指印，否则影响 OD 值。

4、底物显【xiǎn】色【sè】液应呈无【wú】色或很浅的【de】颜色，已经变蓝的【de】底【dǐ】物液不能使用。

5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6、在储存和温育时避免强光直接照射。

7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8、任【rèn】何反应试剂不能接触漂白溶剂【jì】或漂白【bái】溶剂所散【sàn】发的强烈气体。任何漂白【bái】成分【fèn】都会破坏【huài】试剂盒中反应【yīng】试【shì】剂的生物活性。

9、不能使用过期产品。

10、如果可【kě】能传播疾病，所【suǒ】有的样【yàng】品都应管【guǎn】理好，按【àn】照【zhào】规定的程序处理【lǐ】样品和检测装置。

操作步骤:

1. 从室温平衡20min后【hòu】的铝箔袋【dài】中【zhōng】取出【chū】所需板条，剩余板条用自封【fēng】袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本【běn】孔【kǒng】，标准【zhǔn】品孔各加不同【tóng】浓度的标【biāo】准品50μL；

3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔【kǒng】外，标准品孔和样【yàng】本孔中每孔加入辣根过氧化【huà】物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜【mó】封住【zhù】反应孔，37℃水浴【yù】锅或【huò】恒温箱【xiāng】温【wēn】育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍【pāi】干，每孔加满【mǎn】洗涤液【yè】（350μL），静置1min，甩去洗涤【dí】液，吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干，如此【cǐ】重复洗板5次（也可用洗【xǐ】板机洗【xǐ】板）。

6. 每孔【kǒng】加入底物A、B各50μL，37℃避光【guāng】孵育【yù】15min。

7. 每孔【kǒng】加入终止液【yè】50μL，15min内，在【zài】450nm波长【zhǎng】处测定各孔的OD值。

除标【biāo】准品外，4℃保存6个【gè】月内有效【xiào】，标准品【pǐn】4℃保存【cún】，9-23周【zhōu】内有效，-20℃保存6个月内有效，由于标准品一般是冻干粉【fěn】，在制备【bèi】后【hòu】需要严格校准，所以标准品的瓶数【shù】及每瓶标准【zhǔn】品所需加入的稀释液【yè】体积请以实际收到的【de】试剂盒及【jí】标准品标签【qiān】上的【de】标注【zhù】为【wéi】准。

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