大鼠 KAF ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 KAF ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂取出放置30分钟，平【píng】衡至【zhì】室温，所有标【biāo】准品和【hé】样品必需设置平行对照实验，快【kuài】速加入试剂【jì】至样品【pǐn】中，立即漩涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据实验键盘【pán】纸决定【dìng】酶标条的使【shǐ】用量，将剩【shèng】余的酶标【biāo】条连同干燥剂一起放回密封塑料【liào】袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个微【wēi】孔中，除了【le】TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工作【zuò】液至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异【yì】结合）孔【kǒng】。

9. 将【jiāng】酶标孔【kǒng】置于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍【pāi】干微孔内溶【róng】液，加洗涤【dí】液400μL每孔洗3次，每次需拍干【gàn】。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净的【de】无尘【chén】吸水纸【zhǐ】上【shàng】轻巧酶标板数次，以【yǐ】确保没有【yǒu】洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显【xiǎn】色底物溶液，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需在临【lín】用【yòng】前15分钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的光密度值，在570nm至590nm之【zhī】间好有修正，如果酶标仪不【bú】能【néng】自【zì】动【dòng】清除Blank(空白)孔值，那么手动扣【kòu】除每【měi】个【gè】读数的Blank（空白【bái】）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次使用【yòng】试剂盒时，应【yīng】将【jiāng】各【gè】种试剂【jì】管【guǎn】离心数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空【kōng】白调零孔【kǒng】，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调【diào】OD值【zhí】至零。

3. 为【wéi】防止样【yàng】品蒸发，试【shì】验时将【jiāng】反应板放于铺有湿【shī】布的密【mì】闭盒内，酶标板加上盖【gài】或覆膜。

4. 未使用完的酶标【biāo】板或者试剂，请【qǐng】于9-21℃保存，标准品、生【shēng】物-素【sù】标记抗体工作液、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和素工【gōng】作液请依据所需【xū】的量配置【zhì】使【shǐ】用，请勿重复使用【yòng】已稀释过【guò】的【de】标准品、生物【wù】-素标【biāo】记抗体工作液或、辣【là】根过氧化物酶【méi】标记亲和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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