大鼠BMPRⅡ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠BMPRⅡ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种【zhǒng】试【shì】剂【jì】取出放置30分钟，平【píng】衡至室温，所【suǒ】有标准品【pǐn】和样品必需设置平行对照实验，快速加【jiā】入试【shì】剂至样品中，立即漩涡震荡【dàng】2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶【méi】标条【tiáo】的使【shǐ】用量，将剩余【yú】的【de】酶【méi】标条连同干燥剂【jì】一起放回密封塑料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取【qǔ】50μL中和液至各个【gè】微孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶【ǒu】联酶至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体【tǐ】工作液至【zhì】各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置于孔板振动器【qì】上【shàng】，250~500rpm，室温【wēn】孵育【yù】2小时。

10. 在【zài】吸水纸【zhǐ】上【shàng】拍干微孔内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍干【gàn】。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各【gè】微孔，在干净【jìng】的无尘吸【xī】水【shuǐ】纸上轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没有【yǒu】洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底物【wù】溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内【nèi】等体积混合【hé】，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔【kǒng】值，读取450nm处的光密度【dù】值，在570nm至590nm之间好有修正，如【rú】果酶标【biāo】仪不能【néng】自动清【qīng】除【chú】Blank(空白【bái】)孔值，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使【shǐ】用试剂盒时，应将各种试【shì】剂管离心【xīn】数分钟，以便【biàn】试剂集中【zhōng】到【dào】管底。

2. 每【měi】次【cì】实验留一【yī】孔作【zuò】为空白调零孔，该孔不加任何【hé】试【shì】剂，只是zui后【hòu】加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应【yīng】板放于铺有湿布的密闭盒内【nèi】，酶【méi】标板【bǎn】加【jiā】上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶标【biāo】板【bǎn】或者试剂，请于9-21℃保存【cún】，标准品、生物-素标记抗体工【gōng】作【zuò】液、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和【hé】素工作液请依据所【suǒ】需的量配【pèi】置使用，请【qǐng】勿重【chóng】复使用已【yǐ】稀释过的标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工作液或、辣【là】根过氧化物酶标记【jì】亲和素【sù】工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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