小鼠 VCAM-1 ELISA试剂盒（酶联检测法）

产品名称：小鼠 VCAM-1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

商品品牌：酶联生物

英文名称：VCAM-1  ELISA Kit

产品规格：48T/96T

主要成分：酶标板、试剂、标准品等

检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本

例如适合检【jiǎn】测包括血清【qīng】、血浆、尿液、胸【xiōng】腹水、灌洗液、脑脊液【yè】、细胞培【péi】养上清、组织【zhī】匀浆等标【biāo】本

操作步骤：

1）标【biāo】准品的稀【xī】释：本试【shì】剂盒提供【gòng】原倍标准品一支，用户【hù】可按照【zhào】说明书在小试管中进【jìn】行稀释。

2）加样：分别设空白孔（空白对照【zhào】孔不【bú】加样品及酶标试【shì】剂【jì】，其余各【gè】步【bù】操【cāo】作【zuò】相同【tóng】）、标【biāo】准孔、待【dài】测样品孔，在酶【méi】标包被板上标准品准确加样50μl，待【dài】测样品孔【kǒng】中【zhōng】先加样品稀释液40μl，然后再加【jiā】待测样品10μl（样品zui终稀释度【dù】为5倍），加【jiā】样将【jiāng】样品加【jiā】于【yú】酶标板孔底【dǐ】部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3）温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4）配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5）洗涤：小【xiǎo】心揭掉封板【bǎn】膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静【jìng】置30秒后弃去【qù】，如此重【chóng】复5次，拍【pāi】干。

6）加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7）温育：操作同3。

8）洗涤：操作同5。

9）显色：每孔先【xiān】加【jiā】入显色剂A50μl，再加入【rù】显色剂B50μl，轻【qīng】轻震荡混【hún】匀【yún】，37℃避光显色【sè】10分钟.

10）终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。

11）测定【dìng】：以【yǐ】空【kōng】白空调零，450nm波【bō】长依序测量【liàng】各【gè】孔的吸光【guāng】度（OD值），测定应在【zài】加终止液后15分钟以内进行。

注意步骤：

1）在使用前，将所有试剂放置30分钟，平衡至室温。

2）用试剂预【yù】先润洗枪头在使用【yòng】，取各种样【yàng】品、标准品【pǐn】和试剂必【bì】需更换枪头【tóu】。

3）移取标准品和样品到微孔底部。

4）从微孔的边缘加入试剂，以避免污染。

5）本试剂盒使用可拆分的微【wēi】孔酶标条，使【shǐ】用者【zhě】可根据样品【pǐn】量多【duō】少进行拆分，未使用的酶【méi】标【biāo】条保【bǎo】持干燥，密【mì】封于试剂【jì】盒【hé】提供的铝封【fēng】袋中，于4℃保存，微孔酶标条需安装在相应的框架上【shàng】使用。

6）在【zài】加【jiā】入显【xiǎn】色底物前，确保微【wēi】孔【kǒng】内没【méi】有残留的洗涤液，微量【liàng】残留的洗涤液可【kě】能导致分析结果【guǒ】的变化。

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