小鼠 VEGF ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品名称：小鼠 VEGF ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

商品品牌：酶联生物

英文名称：VEGF  ELISA Kit

产品规格：48T/96T

主要成分：酶标板、试剂、标准品等

检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本

例如适合检测【cè】包括【kuò】血【xuè】清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细【xì】胞培【péi】养上清、组织匀浆【jiāng】等标本

操作步骤：

1）标准品的稀释：本试【shì】剂盒提供原【yuán】倍标准品一支，用户【hù】可按【àn】照说明书【shū】在【zài】小试管中进行【háng】稀释【shì】。

2）加【jiā】样：分别【bié】设空白【bái】孔（空白【bái】对照孔【kǒng】不【bú】加样品及酶【méi】标【biāo】试【shì】剂，其【qí】余各【gè】步操作相同）、标【biāo】准孔、待测样品【pǐn】孔，在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加【jiā】样品稀释液40μl，然后再加待【dài】测【cè】样品【pǐn】10μl（样品zui终稀【xī】释度为5倍【bèi】），加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混【hún】匀【yún】。

3）温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4）配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5）洗【xǐ】涤：小心揭掉封板膜【mó】，弃去【qù】液【yè】体，甩干，每孔加满洗涤液，静【jìng】置【zhì】30秒后弃去，如此重复5次【cì】，拍干。

6）加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7）温育：操作同3。

8）洗涤：操作同5。

9）显色【sè】：每【měi】孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂【jì】B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显【xiǎn】色10分【fèn】钟【zhōng】.

10）终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。

11）测定：以空白空【kōng】调零，450nm波长【zhǎng】依序测量各孔【kǒng】的吸【xī】光度（OD值），测定应在加终止液后15分钟以内进行。

注意步骤：

1）在使用前，将所有试剂放置30分钟，平衡至室温。

2）用试剂预先润【rùn】洗枪头在【zài】使用【yòng】，取各种样【yàng】品【pǐn】、标准品和【hé】试剂必需【xū】更换枪头。

3）移取标准品和样品到微孔底部。

4）从微孔的边缘加入试剂，以避免污染。

5）本试剂盒使用【yòng】可拆分的微【wēi】孔酶标条【tiáo】，使用者可根据【jù】样品量多少进行【háng】拆分，未【wèi】使用的酶标【biāo】条【tiáo】保持干燥【zào】，密封于【yú】试剂盒提供【gòng】的铝封【fēng】袋中，于4℃保存，微孔酶标条需安装在相应的框架【jià】上使【shǐ】用。

6）在加【jiā】入显色底物前，确保【bǎo】微孔内没【méi】有残留【liú】的【de】洗【xǐ】涤液，微量残留的洗涤【dí】液可能导致分析【xī】结果的变【biàn】化。

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