小鼠 leptin ELISA试剂盒（酶联检测法）

产品名称：小鼠 leptin ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

商品品牌：酶联生物

英文名称：leptin ELISA Kit

产品规格：48T/96T

主要成分：酶标板、试剂、标准品等

检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本

例【lì】如适合检测包括【kuò】血清、血浆、尿液【yè】、胸腹水、灌【guàn】洗液【yè】、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等【děng】标【biāo】本

操作步骤：

1）标准品的稀释【shì】：本试【shì】剂盒提供【gòng】原倍【bèi】标【biāo】准品一支，用户可按照说明【míng】书【shū】在小试管中进行稀释。

2）加样：分别【bié】设空白孔【kǒng】（空白对照孔【kǒng】不加样品及【jí】酶标试剂，其余各步操【cāo】作相【xiàng】同【tóng】）、标准孔、待测样品孔，在酶标包被板【bǎn】上标【biāo】准品【pǐn】准确加【jiā】样【yàng】50μl，待测样品【pǐn】孔中【zhōng】先加样品稀释液40μl，然【rán】后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度【dù】为【wéi】5倍），加样将【jiāng】样品加于酶标【biāo】板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀【yún】。

3）温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4）配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5）洗涤【dí】：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液【yè】，静置30秒【miǎo】后弃去【qù】，如此重【chóng】复5次，拍【pāi】干。

6）加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7）温育：操作同3。

8）洗涤：操作同5。

9）显色：每孔先【xiān】加入显色剂【jì】A50μl，再加入显【xiǎn】色剂B50μl，轻【qīng】轻震【zhèn】荡混匀，37℃避光显色【sè】10分钟.

10）终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。

11）测定：以空白空调零，450nm波长依【yī】序测量各孔的吸【xī】光度（OD值【zhí】），测定应【yīng】在加终止液【yè】后15分【fèn】钟以内进行。

注意步骤：

1）在使用前，将所有试剂放置30分钟，平衡至室温。

2）用试剂预【yù】先润【rùn】洗枪头在使用，取【qǔ】各种【zhǒng】样品、标准品和【hé】试剂必需更换枪【qiāng】头。

3）移取标准品和样品到微孔底部。

4）从微孔的边缘加入试剂，以避免污染。

5）本试【shì】剂盒使用可拆分的微孔酶标【biāo】条，使用【yòng】者可根据样品量多【duō】少进行【háng】拆分，未【wèi】使【shǐ】用的酶标条保持【chí】干【gàn】燥，密【mì】封于试剂盒提供的【de】铝封【fēng】袋中，于4℃保【bǎo】存，微孔【kǒng】酶标【biāo】条需安装在相应的框架【jià】上使用。

6）在【zài】加【jiā】入显色底物前，确【què】保微孔内没【méi】有残留的洗【xǐ】涤液，微量残【cán】留【liú】的洗涤液可能导【dǎo】致分析结果的变【biàn】化。

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