小鼠 ATⅢ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称：小鼠 ATⅢ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

英　文： ATⅢ ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应【yīng】用：ELISA法【fǎ】定量测定血【xuè】清【qīng】、血浆、细【xì】胞培养上清或其它【tā】相关生物【wù】液体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不用【yòng】的板条【tiáo】应【yīng】立即放回包装袋中，密封【fēng】保存，以【yǐ】免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终止液和底物A、B液时，避免【miǎn】使用带【dài】金【jīn】属部【bù】分的【de】加样【yàng】器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准【zhǔn】品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储【chǔ】存，稀释【shì】前【qián】将标准品振荡混【hún】匀【yún】。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待【dài】测样【yàng】品数量加上标准品【pǐn】的数【shù】量决定所需的板条数，每个标准【zhǔn】品和空【kōng】白孔【kǒng】建议做复【fù】孔。

5)每【měi】个样品【pǐn】根据自己的数【shù】量来【lái】定，能使用复孔的尽量做复孔【kǒng】，标本【běn】用【yòng】标本稀释液1:1稀释后【hòu】加【jiā】入50ul于反应孔内。

6)加入稀释好后【hòu】的标准品50ul于反【fǎn】应【yīng】孔、加入待测样【yàng】品50ul于反应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩【shuǎi】去【qù】孔内液【yè】体，每孔加满【mǎn】洗涤液，振荡【dàng】30秒，甩去洗【xǐ】涤液，用吸水纸【zhǐ】拍干，重复此操作3次。

9)每孔加入【rù】80ul的【de】亲和【hé】链酶素-HRP，轻轻【qīng】振荡混匀，37℃温育30分钟。

10)甩去孔内液体，每孔加满洗涤【dí】液，振荡30秒，甩【shuǎi】去【qù】洗涤液，用【yòng】吸水【shuǐ】纸拍干。重复【fù】此操作【zuò】3次。

11)每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟，避免光【guāng】照【zhào】。

12)取【qǔ】出酶标板，迅速加入50ul终【zhōng】止液【yè】，加入终止液后【hòu】应【yīng】立即测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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