小鼠 ET1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称： 小鼠 ET1 ELISA试剂盒 （酶联免疫检测法）

英　文：ET1 ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预【yù】期应用【yòng】：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上【shàng】清或【huò】其【qí】它相关生物液体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中【zhōng】不用的板条应立【lì】即放回包【bāo】装袋【dài】中，密【mì】封保存，以免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取【qǔ】终止【zhǐ】液和底物【wù】A、B液时，避免使用带金属【shǔ】部分的【de】加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标【biāo】准【zhǔn】品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不【bú】能储存，稀释前将标准品【pǐn】振荡【dàng】混匀【yún】。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测样品数量加【jiā】上【shàng】标【biāo】准品的数量决【jué】定所需的【de】板条【tiáo】数，每个标准品和空【kōng】白孔建【jiàn】议做复孔。

5)每个样品【pǐn】根据【jù】自己的数量【liàng】来定，能使【shǐ】用复孔【kǒng】的尽量做复孔，标本用标本稀【xī】释液【yè】1:1稀释后加入50ul于反应孔【kǒng】内。

6)加入稀【xī】释好后的标准品【pǐn】50ul于反应孔、加【jiā】入待【dài】测样品50ul于【yú】反【fǎn】应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗【xǐ】涤液，用吸【xī】水【shuǐ】纸【zhǐ】拍干，重复【fù】此操【cāo】作3次。

9)每孔【kǒng】加入【rù】80ul的亲和链酶素【sù】-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育【yù】30分钟。

10)甩去孔内液体，每孔加满洗涤【dí】液，振荡【dàng】30秒，甩去【qù】洗涤【dí】液，用吸水纸拍干。重复此操作【zuò】3次。

11)每孔加入底物A、B各【gè】50ul，轻轻振荡混匀【yún】，37℃温【wēn】育10分钟，避免光照。

12)取【qǔ】出酶【méi】标板，迅速加入50ul终止【zhǐ】液，加入终止液后应立【lì】即【jí】测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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