小鼠 CAT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称： 小鼠 CAT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

英　文： CAT ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应【yīng】用：ELISA法定量测定血清、血浆【jiāng】、细胞【bāo】培养上【shàng】清或其它相关【guān】生物【wù】液【yè】体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实【shí】验中不【bú】用的板条应立【lì】即放回包装【zhuāng】袋中，密封保存，以免【miǎn】变质【zhì】。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终止液【yè】和底物A、B液时，避【bì】免使用【yòng】带【dài】金属部分的【de】加样【yàng】器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标【biāo】准品：标【biāo】准品的系列【liè】稀释应【yīng】在实验【yàn】时准备【bèi】，不能储存，稀释前将标准品振荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据【jù】待测样品【pǐn】数【shù】量加上标准品的【de】数量决定所【suǒ】需的板【bǎn】条数，每个标准【zhǔn】品和空白孔建【jiàn】议做复孔。

5)每个样品根据自己的数量【liàng】来定，能使用复孔的尽量做复【fù】孔【kǒng】，标本用标本稀释液【yè】1:1稀【xī】释后加【jiā】入50ul于反【fǎn】应孔【kǒng】内。

6)加入稀释好后的标准品50ul于【yú】反【fǎn】应孔、加入待测【cè】样品50ul于反应孔【kǒng】内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去【qù】孔【kǒng】内液体，每孔加满【mǎn】洗涤【dí】液，振荡【dàng】30秒，甩【shuǎi】去洗涤液，用吸水纸拍干，重复此操【cāo】作3次【cì】。

9)每孔加入【rù】80ul的亲和链酶【méi】素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温【wēn】育30分钟。

10)甩去【qù】孔内【nèi】液【yè】体，每孔加满洗涤液，振荡30秒【miǎo】，甩去洗涤液，用吸【xī】水纸拍干。重复此操作3次。

11)每孔加入底【dǐ】物A、B各【gè】50ul，轻轻【qīng】振荡混匀，37℃温育10分钟，避免【miǎn】光照【zhào】。

12)取出酶标【biāo】板【bǎn】，迅速加入50ul终止【zhǐ】液，加入终止液后应【yīng】立即测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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