小鼠 HMGB1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称：小鼠 HMGB1 ELISA试剂盒 （酶联免疫检测法）

英　文： HMGB1 ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预【yù】期应用：ELISA法定量测定【dìng】血【xuè】清、血浆、细胞培养上清或其它【tā】相关生物液体中BAP含【hán】量【liàng】

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中【zhōng】不用的板条应立【lì】即【jí】放【fàng】回包【bāo】装袋中，密封保存，以免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸【xī】取终止液和底物【wù】A、B液时，避免使用带金属部分的【de】加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准品：标准品的【de】系列稀释应在实【shí】验【yàn】时【shí】准备，不【bú】能储存，稀释前将标准品【pǐn】振荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待【dài】测【cè】样品数量加上标准【zhǔn】品【pǐn】的数量决定所需的板条数，每【měi】个标准品【pǐn】和空【kōng】白孔建议做复【fù】孔。

5)每个样【yàng】品根【gēn】据自【zì】己的数量来【lái】定【dìng】，能使用复孔的尽量做复孔，标本用【yòng】标本稀释液【yè】1:1稀释后加入【rù】50ul于反应孔【kǒng】内。

6)加入稀释好后的【de】标准【zhǔn】品50ul于反应孔、加【jiā】入待测样品50ul于【yú】反应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒【miǎo】，甩去【qù】洗【xǐ】涤【dí】液【yè】，用吸水纸拍干，重复此操作【zuò】3次。

9)每孔加入80ul的【de】亲和链酶素-HRP，轻轻振【zhèn】荡混【hún】匀，37℃温【wēn】育30分钟。

10)甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振【zhèn】荡30秒，甩去洗涤【dí】液，用吸【xī】水纸【zhǐ】拍干。重【chóng】复此操作3次。

11)每孔加入【rù】底物A、B各50ul，轻轻振荡【dàng】混匀【yún】，37℃温育10分【fèn】钟，避免光照。

12)取出【chū】酶标【biāo】板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后【hòu】应立即【jí】测定【dìng】结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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