小鼠 EGVEGF ELISA试剂盒（酶联检测法）

名  称： 小鼠 EGVEGF ELISA试剂盒（酶联检测法）

英　文： EGVEGF ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应用：ELISA法【fǎ】定量测定血清、血浆、细【xì】胞【bāo】培【péi】养上清或【huò】其【qí】它相关生物液体【tǐ】中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验【yàn】中不【bú】用的板条应立即【jí】放【fàng】回包装袋中，密【mì】封保存，以免变【biàn】质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸【xī】取【qǔ】终【zhōng】止液和底物A、B液时，避免使【shǐ】用带金属部【bù】分【fèn】的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准品：标【biāo】准品的系列【liè】稀【xī】释应【yīng】在实验时准备【bèi】，不能储存，稀释前将标【biāo】准品振荡【dàng】混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测样品数量加上标准【zhǔn】品的数【shù】量【liàng】决定所需的【de】板条数，每个标准品和空白【bái】孔建议【yì】做复【fù】孔。

5)每【měi】个样品根据【jù】自【zì】己的【de】数量来定，能使用复【fù】孔【kǒng】的尽量做复孔，标本用标本稀释液1:1稀【xī】释后加入50ul于反应孔内。

6)加【jiā】入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待【dài】测样品【pǐn】50ul于反【fǎn】应孔内【nèi】。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩【shuǎi】去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗【xǐ】涤液，用【yòng】吸水纸拍【pāi】干【gàn】，重复此操作3次【cì】。

9)每孔加入【rù】80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振【zhèn】荡混匀，37℃温【wēn】育30分【fèn】钟。

10)甩去孔内液体【tǐ】，每孔【kǒng】加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗【xǐ】涤【dí】液，用吸【xī】水纸【zhǐ】拍干。重复此操作3次。

11)每孔加【jiā】入底物【wù】A、B各50ul，轻轻振【zhèn】荡混匀，37℃温育【yù】10分钟，避免光照。

12)取出酶【méi】标板，迅【xùn】速加【jiā】入50ul终【zhōng】止液，加入终【zhōng】止液后应立即测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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