小鼠 IL-35 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称： 小鼠 IL-35 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

英　文：IL-35  ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应用【yòng】：ELISA法定量测定血清【qīng】、血浆【jiāng】、细胞培养上清或【huò】其它相关生物液【yè】体中BAP含【hán】量【liàng】

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验【yàn】中不用【yòng】的板【bǎn】条【tiáo】应立即放回包装袋中【zhōng】，密封保【bǎo】存，以免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终【zhōng】止液和底物【wù】A、B液时，避免使【shǐ】用【yòng】带金属【shǔ】部分【fèn】的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标【biāo】准品【pǐn】：标准品的系列稀释应【yīng】在实验【yàn】时准备，不能储【chǔ】存【cún】，稀释前将标【biāo】准品振荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测样品数【shù】量加上标准品【pǐn】的数量决定所需的板【bǎn】条数，每个标【biāo】准品和空【kōng】白【bái】孔建【jiàn】议做复【fù】孔。

5)每个样品根据自【zì】己的数量来定，能使用【yòng】复孔的尽量做复孔，标【biāo】本用标本【běn】稀【xī】释【shì】液【yè】1:1稀释后加【jiā】入50ul于反应孔【kǒng】内。

6)加入稀释好后【hòu】的标准【zhǔn】品50ul于反应孔、加入待【dài】测样【yàng】品50ul于反应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔【kǒng】内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒【miǎo】，甩去【qù】洗涤液，用吸水纸拍干，重【chóng】复此操作【zuò】3次。

9)每【měi】孔加【jiā】入80ul的亲【qīn】和链酶【méi】素-HRP，轻轻【qīng】振荡混匀，37℃温育30分钟。

10)甩去孔内液体，每孔加满【mǎn】洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复【fù】此【cǐ】操作3次。

11)每【měi】孔加入底物A、B各【gè】50ul，轻轻振荡混匀【yún】，37℃温育【yù】10分钟，避免光照。

12)取【qǔ】出【chū】酶标板【bǎn】，迅速加入50ul终止液，加入终【zhōng】止【zhǐ】液后应立即测【cè】定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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