小鼠POMC ELISA试剂盒 ( 酶联免疫检测法）

名  称： 小鼠POMC ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

英　文：POMC ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应用【yòng】：ELISA法【fǎ】定量测定血清、血【xuè】浆【jiāng】、细胞【bāo】培养上清或其它相【xiàng】关生【shēng】物液体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不用【yòng】的板【bǎn】条【tiáo】应立即放回包【bāo】装袋中，密封保存，以【yǐ】免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸【xī】取终【zhōng】止液和底物A、B液时，避【bì】免使用带金【jīn】属部【bù】分的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标【biāo】准【zhǔn】品：标准品【pǐn】的系列稀释应在实验时【shí】准【zhǔn】备，不能储【chǔ】存，稀释前将标准品振荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根【gēn】据待【dài】测【cè】样品数量加上标准品【pǐn】的数量决定所需的板条数，每个【gè】标准品和【hé】空白【bái】孔建议做复孔。

5)每个样品根据自【zì】己的数量来定，能使用复【fù】孔的尽量【liàng】做复【fù】孔，标本用标本【běn】稀【xī】释【shì】液1:1稀释后加入50ul于反应【yīng】孔内【nèi】。

6)加【jiā】入稀释好后【hòu】的标准品50ul于反应孔、加入待【dài】测样品【pǐn】50ul于【yú】反【fǎn】应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液体，每孔加满洗涤液【yè】，振【zhèn】荡30秒【miǎo】，甩去洗涤【dí】液，用吸水纸拍干【gàn】，重【chóng】复此操作3次。

9)每孔【kǒng】加入80ul的【de】亲和链酶素-HRP，轻轻振【zhèn】荡混匀，37℃温育30分钟。

10)甩去孔内【nèi】液体，每孔【kǒng】加满【mǎn】洗【xǐ】涤液，振荡30秒，甩去洗涤液【yè】，用【yòng】吸【xī】水纸拍干。重复此操作3次。

11)每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育【yù】10分钟【zhōng】，避免【miǎn】光照。

12)取出酶标【biāo】板，迅速加入50ul终止液【yè】，加【jiā】入终止液后【hòu】应立即【jí】测【cè】定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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