大鼠 TNFα ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品名称：大鼠 TNFα ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：96T/48T

库存状态：现货供应

产品保存：低温避光保存

适用范围：仅供使用

运输方式：快递

检测目的：用于测定血清、血浆及相关液体等样本

注意事项

1. 严格按照规定的时间和【hé】温度进行温育以保证【zhèng】准确结果，使用后立【lì】即冷【lěng】藏【cáng】保存【cún】试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结【jié】果，在【zài】加【jiā】入底物前确保【bǎo】尽【jìn】量吸【xī】干孔内液体。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底物显【xiǎn】色液应呈无【wú】色或很浅【qiǎn】的颜色，已经【jīng】变蓝的底物液不能使【shǐ】用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在【zài】储【chǔ】存和温育时避免强光直【zhí】接照射，温【wēn】育过程中不要让微孔干【gàn】燥【zào】掉。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试【shì】剂【jì】不能【néng】接触漂白溶【róng】剂或漂白溶剂所散发的强烈气体【tǐ】。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可【kě】能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照【zhào】规【guī】定的程序【xù】处理样品【pǐn】和【hé】检测装置。

11. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

操作步骤：

1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和【hé】待测样【yàng】本：取足够数【shù】量的酶标【biāo】包被板，固定于框架上，分【fèn】别设置【zhì】标【biāo】准品孔、待【dài】测样本孔和空白对照【zhào】孔【kǒng】，记录各孔位置，在标【biāo】准品孔中【zhōng】加入标准品50μL；待测样【yàng】本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀【xī】释【shì】液40μL（即【jí】样本稀释5倍）；空白【bái】对照孔【kǒng】不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去【qù】液体，吸水纸上拍【pāi】干，每孔加满【mǎn】洗涤液，静置【zhì】1min，甩去洗涤液【yè】，吸【xī】水纸上【shàng】拍【pāi】干【gàn】，如此重复洗板4次【cì】（也可用洗板机按说明书操作洗板）。

6、加酶标工【gōng】作液：每孔加入【rù】酶标【biāo】工作液50μL，空白对照孔【kǒng】不加。

7、温育：重复4的操作。

8、洗板：重复5的操作。

9、显色：每孔先加入【rù】显色【sè】剂【jì】A 液【yè】50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光【guāng】显色15min。

10、终止：取出酶标【biāo】板，每孔【kǒng】加终【zhōng】止液50μL，终止【zhǐ】反应【yīng】（颜色由蓝色立转）。

11、测【cè】定【dìng】：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长【zhǎng】测【cè】量各孔的吸光【guāng】值（OD值）。

12、计算【suàn】：根【gēn】据标准品的浓度及对【duì】应的OD值，计算出标准曲线【xiàn】的直线回归【guī】方程，再根据样【yàng】本的OD值【zhí】，在回归【guī】方程上计算【suàn】出对应的样【yàng】品浓度，也可以使用各种【zhǒng】应用软件来计算，终浓度为实际测定浓度乘以【yǐ】稀释倍数。

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