大鼠TNFalpha 试剂盒（酶联免疫检测法）

产品名称：大鼠TNFalpha 试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：96T/48T

库存状态：现货供应

产品保存：低温避光保存

适用范围：仅供使用

运输方式：快递

检测目的：用于测定血清、血浆及相关液体等样本

注意事项

1. 严格按照【zhào】规定的时间和温度进行温育以保证准【zhǔn】确结【jié】果，使用后立即冷【lěng】藏【cáng】保存【cún】试剂【jì】。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果【guǒ】，在【zài】加入【rù】底【dǐ】物前确【què】保尽量【liàng】吸干孔内液体。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底物【wù】显色液应呈无色或很【hěn】浅【qiǎn】的颜色，已【yǐ】经变蓝的底物【wù】液【yè】不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储【chǔ】存和温育时避免强光直接照射，温育【yù】过程中不要【yào】让微【wēi】孔干【gàn】燥掉。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应【yīng】试剂不能接【jiē】触漂白溶剂或【huò】漂【piāo】白溶剂所散发的【de】强烈气体。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可【kě】能传播疾病，所【suǒ】有的样品都应管理好，按照规【guī】定【dìng】的程序【xù】处【chù】理样品和检测装置。

11. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

操作步骤：

1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准【zhǔn】品和待【dài】测【cè】样本：取足够数量的酶【méi】标包被【bèi】板，固定于框架上，分【fèn】别设置标准品【pǐn】孔、待测样本孔和空【kōng】白对照孔，记录各【gè】孔位【wèi】置，在标准【zhǔn】品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加【jiā】入待测样本【běn】10μL，再加样本稀【xī】释【shì】液40μL（即样本稀释【shì】5倍）；空白【bái】对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液体，吸【xī】水【shuǐ】纸上拍干【gàn】，每孔加满【mǎn】洗涤【dí】液，静置1min，甩【shuǎi】去洗涤液，吸水纸【zhǐ】上拍干，如此重复洗板4次（也【yě】可【kě】用洗板机【jī】按说明书操【cāo】作洗板【bǎn】）。

6、加酶标【biāo】工作液【yè】：每孔【kǒng】加【jiā】入酶标工【gōng】作液50μL，空白对照孔不【bú】加。

7、温育：重复4的操作。

8、洗板：重复5的操作。

9、显色：每【měi】孔先加入显色【sè】剂【jì】A 液50μL，再加入显【xiǎn】色剂【jì】B液 50μL，37℃避光显色15min。

10、终止：取【qǔ】出酶标【biāo】板，每孔加终【zhōng】止液50μL，终【zhōng】止反应（颜色由蓝色【sè】立转）。

11、测定：以【yǐ】空白孔调零，在终止后【hòu】15分钟【zhōng】内，用【yòng】450nm波【bō】长测量各孔的吸光值（OD值）。

12、计算：根据标准品的浓度及对应的【de】OD值，计算出【chū】标准【zhǔn】曲线的直线回归方程，再【zài】根【gēn】据样【yàng】本的OD值，在回归方程上计算出【chū】对应的【de】样品【pǐn】浓度，也【yě】可以使用各【gè】种【zhǒng】应用软【ruǎn】件来计算，终浓度为实际测定浓度乘以【yǐ】稀释倍数【shù】。

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