大鼠Irisin ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品名称：大鼠Irisin ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：96T/48T

库存状态：现货供应

产品保存：低温避光保存

适用范围：仅供使用

运输方式：快递

检测目的：用于测定血清、血浆及相关液体等样本

注意事项

1. 严【yán】格按照规定的时间和温【wēn】度进行温育以保【bǎo】证准确结果，使用后立【lì】即冷藏保【bǎo】存试【shì】剂【jì】。

2. 洗板不正确可以导致不准确【què】的结【jié】果，在加入底物前确【què】保尽量【liàng】吸【xī】干孔内液体【tǐ】。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或【huò】很浅的【de】颜色【sè】，已经【jīng】变蓝的底【dǐ】物液不能【néng】使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育【yù】时避免【miǎn】强光直【zhí】接照射，温【wēn】育过程中不【bú】要让【ràng】微孔干燥掉。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反【fǎn】应试剂【jì】不能接【jiē】触漂白溶剂或【huò】漂白溶【róng】剂【jì】所散发的强烈气体。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可【kě】能传播疾病，所有【yǒu】的样品都【dōu】应管理好，按照规定【dìng】的程序【xù】处理【lǐ】样品和检【jiǎn】测装置。

11. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

操作步骤：

1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和【hé】待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别【bié】设置【zhì】标准品孔、待测样本【běn】孔和空白【bái】对照孔，记录各孔位【wèi】置，在标准品孔中【zhōng】加【jiā】入标【biāo】准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再【zài】加样本稀【xī】释液40μL（即【jí】样本【běn】稀释5倍）；空白对照孔【kǒng】不【bú】加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去【qù】液【yè】体，吸水纸【zhǐ】上拍【pāi】干，每孔加满洗涤液【yè】，静置1min，甩去洗【xǐ】涤液【yè】，吸水纸【zhǐ】上拍干，如此重复洗板4次（也可用【yòng】洗【xǐ】板机按【àn】说明书操作洗板）。

6、加酶标工作液：每孔加入酶【méi】标工【gōng】作液50μL，空白【bái】对照【zhào】孔不加【jiā】。

7、温育：重复4的操作。

8、洗板：重复5的操作。

9、显色：每孔先加入【rù】显【xiǎn】色【sè】剂A 液50μL，再加【jiā】入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。

10、终【zhōng】止：取出【chū】酶标板【bǎn】，每孔加终止液【yè】50μL，终止反应（颜色由蓝【lán】色立转）。

11、测定【dìng】：以空白孔调【diào】零，在终止后15分钟内【nèi】，用450nm波长测量各孔的吸光值【zhí】（OD值）。

12、计算：根据标准品的浓度【dù】及【jí】对应的OD值，计算出标准曲线的直线回【huí】归方程【chéng】，再根据样本的OD值【zhí】，在回归方程上【shàng】计算出【chū】对应的样【yàng】品浓度【dù】，也【yě】可以使用【yòng】各种应用软件来计算【suàn】，终浓度为实【shí】际测【cè】定浓度乘以稀释【shì】倍数【shù】。

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