大鼠 GSK ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GSK ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂【jì】取出放【fàng】置30分钟【zhōng】，平衡至室温，所有标准品和【hé】样品【pǐn】必需设置平行对照实验，快速加【jiā】入【rù】试剂至样品中，立即【jí】漩涡震荡【dàng】2秒【miǎo】混匀。

1. 依【yī】据【jù】实验键盘纸决定酶【méi】标条的使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放【fàng】回【huí】密封【fēng】塑料袋【dài】，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液【yè】至各【gè】个微孔中，除【chú】了TA（全【quán】活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合【hé】）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各孔中，除【chú】了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空【kōng】白【bái】）孔和NSB（非【fēi】特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔板【bǎn】振动器【qì】上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍干【gàn】微孔内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后【hòu】一次【cì】洗涤，清空各微孔，在【zài】干净的无尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶【méi】标板数次，以确保没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底【dǐ】物溶液，于室温静【jìng】置5~30分钟【zhōng】。（显色底物【wù】A和B需在临用【yòng】前15分钟内等体积混合【hé】，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔【kǒng】值，读取450nm处的光【guāng】密度【dù】值【zhí】，在570nm至590nm之间【jiān】好有修正，如【rú】果酶标【biāo】仪不能自【zì】动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次【cì】使用试剂盒时【shí】，应【yīng】将各种试剂管离心数分钟，以【yǐ】便试【shì】剂【jì】集中到管底。

2. 每次【cì】实验留一孔【kǒng】作为空【kōng】白调【diào】零孔，该【gāi】孔不加任【rèn】何试剂【jì】，只是zui后加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防止样【yàng】品蒸发，试验时【shí】将反应板放于铺有湿布的【de】密【mì】闭盒【hé】内，酶标板加上盖或覆膜【mó】。

4. 未使【shǐ】用完的酶【méi】标板或【huò】者试【shì】剂，请【qǐng】于【yú】9-23℃保存，标准品、生物-素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶【méi】标记亲和素工【gōng】作液请【qǐng】依据所需【xū】的量配【pèi】置使用，请勿重复使用已稀释过的标准【zhǔn】品、生【shēng】物-素标记抗体【tǐ】工作液或、辣根过【guò】氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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