大鼠8isoPG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠8isoPG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试剂取出放置30分钟，平衡【héng】至室温，所有标准品和【hé】样品必需设置平行对照实验【yàn】，快速【sù】加入【rù】试【shì】剂至样品中，立即漩【xuán】涡震荡【dàng】2秒混匀【yún】。

1. 依据实【shí】验键盘纸决定【dìng】酶标条的使用【yòng】量，将剩余【yú】的酶标条连同干燥剂【jì】一起放【fàng】回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液【yè】至各个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶【méi】至各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作液【yè】至各孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和【hé】NSB（非【fēi】特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔【kǒng】置于孔板【bǎn】振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干【gàn】微孔内溶【róng】液，加洗涤液【yè】400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空【kōng】各【gè】微孔，在干净的无尘【chén】吸水纸上轻【qīng】巧酶标板【bǎn】数次，以确保没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底物溶液，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需【xū】在【zài】临用前15分钟内等体积【jī】混合【hé】，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶【méi】标仪不【bú】能自动清【qīng】除【chú】Blank(空白)孔值，那么手动扣【kòu】除每【měi】个读数【shù】的【de】Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试剂【jì】盒时，应将各种【zhǒng】试剂【jì】管离心数分钟，以便试剂【jì】集中到【dào】管底。

2. 每次实验【yàn】留一【yī】孔作为空白调零孔，该孔不【bú】加任【rèn】何试剂【jì】，只【zhī】是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验时将反【fǎn】应板放【fàng】于【yú】铺有湿布的密【mì】闭盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板【bǎn】或者试剂【jì】，请于【yú】9-23℃保存，标准品【pǐn】、生物-素标记抗【kàng】体工作【zuò】液【yè】、辣根过氧【yǎng】化【huà】物酶标记亲和素工【gōng】作【zuò】液【yè】请依据所需的量配置使【shǐ】用，请勿重复使用已【yǐ】稀释过的标准品【pǐn】、生物-素【sù】标记抗体工作液或、辣根【gēn】过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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