大鼠 GP-MM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GP-MM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试剂取出放置【zhì】30分钟，平衡至室温，所有【yǒu】标【biāo】准品和样品必需设置【zhì】平行对照【zhào】实验，快速加入【rù】试剂至样品中，立即【jí】漩【xuán】涡【wō】震荡2秒混【hún】匀。

1. 依【yī】据实验键盘纸决定酶标条的【de】使用量【liàng】，将剩【shèng】余的酶标【biāo】条连同干【gàn】燥剂一起放回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和【hé】B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶【ǒu】联【lián】酶至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各【gè】孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时【shí】。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微【wēi】孔内溶【róng】液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一次【cì】洗涤，清空【kōng】各【gè】微孔，在【zài】干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次，以确保【bǎo】没有洗涤液【yè】残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟。（显色底物【wù】A和B需在临用前【qián】15分【fèn】钟内等体积混【hún】合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空【kōng】白）孔值，读取【qǔ】450nm处的【de】光密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能自动【dòng】清除Blank(空白)孔值，那么手【shǒu】动扣【kòu】除每个读数的【de】Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试【shì】剂盒时【shí】，应将各种【zhǒng】试剂管离心数分【fèn】钟，以便试【shì】剂集中到【dào】管底。

2. 每次实验留一孔作【zuò】为空白调零孔，该【gāi】孔不加任何试剂，只是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测【cè】量时先用此【cǐ】孔调【diào】OD值至【zhì】零。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发，试验时【shí】将反应【yīng】板放于铺【pù】有湿布的密【mì】闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶【méi】标板或者试剂，请于9-22℃保存【cún】，标准品、生【shēng】物-素标记抗体工作液【yè】、辣根【gēn】过氧【yǎng】化【huà】物酶【méi】标记亲【qīn】和【hé】素工作液请依据所【suǒ】需的量配置使用，请勿重复【fù】使用已【yǐ】稀释【shì】过的标准品、生物-素标【biāo】记抗体工【gōng】作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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