小鼠 TNF-α ELISA试剂盒（酶联检测法）

产品名称：小鼠 TNF-α ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

商品品牌：酶联生物

英文名称： TNF-α ELISA Kit

产品规格：48T/96T

主要成分：酶标板、试剂、标准品等

检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本

例【lì】如适合检测包括血清、血【xuè】浆、尿液、胸腹【fù】水、灌【guàn】洗液、脑脊【jǐ】液、细胞培养上清、组织匀浆等【děng】标本【běn】

操作步骤：

1）标准【zhǔn】品的稀释：本试剂盒提供原【yuán】倍标准品一支，用户可【kě】按照说明书【shū】在小试【shì】管【guǎn】中进行稀释【shì】。

2）加样：分别设空白【bái】孔（空白【bái】对照孔不加【jiā】样品及酶标试剂，其【qí】余各步操作相【xiàng】同）、标准孔、待测样品孔【kǒng】，在酶标包被【bèi】板上标准【zhǔn】品准确加样50μl，待测样品孔【kǒng】中先加样【yàng】品【pǐn】稀释液40μl，然后再【zài】加待【dài】测样品10μl（样品zui终稀释度为【wéi】5倍【bèi】），加【jiā】样将样品加于酶标【biāo】板孔底部，尽【jìn】量不触及孔壁【bì】，轻轻晃【huǎng】动混匀。

3）温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4）配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去【qù】液【yè】体，甩干，每孔加满洗涤液，静置【zhì】30秒【miǎo】后弃去，如此重复【fù】5次【cì】，拍干。

6）加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7）温育：操作同3。

8）洗涤：操作同5。

9）显色：每孔【kǒng】先加入显色剂A50μl，再【zài】加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光【guāng】显色10分【fèn】钟.

10）终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。

11）测定：以空白空调零，450nm波长依序测量【liàng】各孔的【de】吸光度【dù】（OD值【zhí】），测定【dìng】应在加【jiā】终止液后15分钟以内【nèi】进【jìn】行。

注意步骤：

1）在使用前，将所有试剂放置30分钟，平衡至室温。

2）用试剂【jì】预先润洗枪头在使用，取【qǔ】各种样品、标准【zhǔn】品和试【shì】剂必【bì】需更【gèng】换枪头【tóu】。

3）移取标准品和样品到微孔底部。

4）从微孔的边缘加入试剂，以避免污染。

5）本试【shì】剂盒使用可拆分的【de】微孔酶标条，使用【yòng】者可根据样品量【liàng】多少进行拆【chāi】分，未使【shǐ】用的酶标条保持干燥【zào】，密封【fēng】于试剂盒提供【gòng】的铝封袋中，于4℃保存【cún】，微孔酶【méi】标条需安装在相【xiàng】应的框架上使用【yòng】。

6）在加入显色底物前，确保微孔内没有残留的洗涤液，微量【liàng】残留的【de】洗涤液可【kě】能导【dǎo】致分析【xī】结【jié】果【guǒ】的变【biàn】化。

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