小鼠 TNFα ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品名称：小鼠 TNFα ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

商品品牌：酶联生物

英文名称： TNFα ELISA Kit

产品规格：48T/96T

主要成分：酶标板、试剂、标准品等

检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本

例如适【shì】合检测包括血【xuè】清、血浆、尿液、胸腹【fù】水、灌洗液、脑脊液【yè】、细胞培养上清【qīng】、组织匀浆【jiāng】等标本

操作步骤：

1）标准品的【de】稀释：本试剂【jì】盒提【tí】供原倍标【biāo】准品一【yī】支，用户可按照说明书在小试管中进行稀释。

2）加【jiā】样：分别【bié】设【shè】空白孔（空白对照【zhào】孔【kǒng】不加样品及酶标试剂，其余各步操作【zuò】相同）、标准孔、待测样【yàng】品孔【kǒng】，在酶【méi】标包被【bèi】板【bǎn】上【shàng】标准【zhǔn】品准确加样50μl，待测样品孔【kǒng】中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品【pǐn】10μl（样品zui终稀释度【dù】为5倍），加样将样【yàng】品加【jiā】于酶标【biāo】板孔底部，尽量不【bú】触及孔【kǒng】壁，轻【qīng】轻晃动混匀。

3）温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4）配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5）洗涤：小心【xīn】揭【jiē】掉【diào】封【fēng】板膜，弃去液体，甩干【gàn】，每孔加满洗涤液，静置【zhì】30秒后弃去，如此重复【fù】5次【cì】，拍干。

6）加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7）温育：操作同3。

8）洗涤：操作同5。

9）显【xiǎn】色：每孔先【xiān】加入【rù】显色剂A50μl，再加入【rù】显色剂B50μl，轻轻震荡混匀【yún】，37℃避光显色【sè】10分钟.

10）终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。

11）测定：以【yǐ】空白空调零，450nm波长依序【xù】测量各孔的吸【xī】光度【dù】（OD值），测定应在加【jiā】终止【zhǐ】液后15分【fèn】钟以【yǐ】内进行。

注意步骤：

1）在使用前，将所有试剂放置30分钟，平衡至室温。

2）用试剂【jì】预【yù】先润洗【xǐ】枪头在使用，取各种样品、标【biāo】准品和试剂必需更【gèng】换【huàn】枪头。

3）移取标准品和样品到微孔底部。

4）从微孔的边缘加入试剂，以避免污染。

5）本试剂盒使【shǐ】用可拆【chāi】分的微孔酶标【biāo】条，使用者可根据【jù】样品量多【duō】少进行【háng】拆【chāi】分，未使【shǐ】用的酶【méi】标【biāo】条保【bǎo】持干燥，密封【fēng】于试剂【jì】盒提供的铝封袋中，于4℃保存，微孔酶标【biāo】条需安装在相应的框架上使用。

6）在【zài】加入显【xiǎn】色底物前，确【què】保微孔内没【méi】有【yǒu】残留的洗涤液，微量残留的洗涤液可【kě】能【néng】导致分析结果的【de】变化。

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