小鼠 TNF-a ELISA试剂盒（酶联检测法）

产品名称：小鼠 TNF-a ELISA试剂盒（酶联检测法）

商品品牌：酶联生物

英文名称： TNF-a ELISA Kit

产品规格：48T/96T

主要成分：酶标板、试剂、标准品等

检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本

例如适【shì】合检测包括血清、血浆、尿【niào】液、胸腹水、灌洗【xǐ】液、脑脊液、细胞培【péi】养【yǎng】上清、组织匀【yún】浆等标本

操作步骤：

1）标【biāo】准品的【de】稀释【shì】：本试剂盒提【tí】供原倍标准品一支，用【yòng】户可按照【zhào】说明【míng】书在小试管中进行稀释。

2）加样【yàng】：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶【méi】标【biāo】试剂，其余各步操作【zuò】相同）、标准孔、待测样品孔，在酶标包【bāo】被板【bǎn】上标准品准确【què】加样【yàng】50μl，待测【cè】样品孔【kǒng】中先加样品【pǐn】稀【xī】释液40μl，然后再加待测样品10μl（样【yàng】品zui终稀释度为【wéi】5倍），加【jiā】样将样品【pǐn】加于酶标板孔【kǒng】底部【bù】，尽【jìn】量不触及孔壁【bì】，轻轻晃【huǎng】动混匀【yún】。

3）温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4）配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩【shuǎi】干，每【měi】孔加满洗【xǐ】涤液，静置30秒后【hòu】弃去，如【rú】此重复【fù】5次【cì】，拍【pāi】干。

6）加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7）温育：操作同3。

8）洗涤：操作同5。

9）显色：每【měi】孔先【xiān】加入显色剂【jì】A50μl，再加入显色【sè】剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

10）终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。

11）测定：以空白空【kōng】调零，450nm波长依序测量各【gè】孔的吸光【guāng】度【dù】（OD值），测定【dìng】应在加【jiā】终止液【yè】后15分钟以内进行。

注意步骤：

1）在使用前，将所有试剂放置30分钟，平衡至室温。

2）用【yòng】试剂预先润洗枪【qiāng】头在【zài】使用，取各种样品、标准【zhǔn】品和试剂必需更换枪头【tóu】。

3）移取标准品和样品到微孔底部。

4）从微孔的边缘加入试剂，以避免污染。

5）本试【shì】剂盒使用【yòng】可拆分的微孔【kǒng】酶标条，使用者可根【gēn】据样品量多少进行拆分【fèn】，未使用的【de】酶标条保【bǎo】持【chí】干燥，密【mì】封于试剂盒提供的铝封【fēng】袋【dài】中【zhōng】，于4℃保存，微孔【kǒng】酶【méi】标条【tiáo】需安装在相应的框【kuàng】架上使用。

6）在加【jiā】入显色底物前，确保【bǎo】微孔【kǒng】内没有残留的洗涤液，微量残【cán】留的洗涤液可能导致【zhì】分析【xī】结果【guǒ】的变化。

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