产品时间:2024-9-23
小【xiǎo】鼠 TNF-a ELISA试剂盒(酶联免【miǎn】疫【yì】检测法【fǎ】)由上海酶【méi】联生物提供【gòng】,包括小鼠 TNF-a ELISA试剂盒【hé】说明书,酶联免疫检测试剂【jì】盒免费代测等产【chǎn】品【pǐn】详细介绍。
产品名称:小鼠 TNF-a ELISA试剂盒(酶联免疫检测法)
商品品牌:酶联生物
英文名称:TNF-a ELISA Kit
产品规格:48T/96T
主要成分:酶标板、试剂、标准品等
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本
例如【rú】适合检测包括【kuò】血【xuè】清、血【xuè】浆、尿液【yè】、胸腹水、灌洗液、脑【nǎo】脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本
操作步骤:
1)标准品的稀释:本试剂【jì】盒提供原倍【bèi】标【biāo】准品一支,用户可按照【zhào】说【shuō】明书在【zài】小试管中进行【háng】稀释。
2)加【jiā】样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品【pǐn】及酶标试剂【jì】,其余各步操【cāo】作相同【tóng】)、标【biāo】准孔、待测样品孔,在酶标包被板上标【biāo】准【zhǔn】品准确加样50μl,待测样【yàng】品孔中先加【jiā】样【yàng】品稀释液40μl,然后再【zài】加待测【cè】样品【pǐn】10μl(样品zui终稀释度为5倍),加样将样品加于【yú】酶【méi】标板孔底部,尽量【liàng】不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3)温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4)配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5)洗涤:小心揭掉封板膜,弃【qì】去液体,甩【shuǎi】干,每孔加满洗【xǐ】涤液,静【jìng】置30秒后弃去,如【rú】此重复5次,拍干【gàn】。
6)加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7)温育:操作同3。
8)洗涤:操作同5。
9)显【xiǎn】色:每孔先加【jiā】入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混【hún】匀,37℃避光显【xiǎn】色10分钟【zhōng】.
10)终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转)。
11)测定:以空【kōng】白【bái】空调零,450nm波长依序测【cè】量【liàng】各孔的【de】吸光度(OD值),测定应在加终止液后15分钟以内进【jìn】行。
注意步骤:
1)在使用前,将所有试剂放置30分钟,平衡至室温。
2)用试剂预先【xiān】润洗枪头【tóu】在【zài】使用,取各【gè】种【zhǒng】样品、标准品和【hé】试剂必需更换枪头。
3)移取标准品和样品到微孔底部。
4)从微孔的边缘加入试剂,以避免污染。
5)本试剂盒【hé】使【shǐ】用可拆【chāi】分的【de】微孔酶标条,使用者可根据【jù】样品量多少进【jìn】行拆【chāi】分,未使用的酶标条保持干【gàn】燥【zào】,密【mì】封于试剂盒提供【gòng】的铝封袋中,于4℃保存,微孔酶标【biāo】条需安装【zhuāng】在相【xiàng】应【yīng】的框架上使用。
6)在加入显色底物【wù】前,确保【bǎo】微孔内没有残留的洗涤液,微【wēi】量【liàng】残留的洗【xǐ】涤液可【kě】能导致分析结果的变化【huà】。
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