小鼠 ghrelin 试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称： 小鼠 ghrelin 试剂盒（酶联免疫检测法）

英　文： ghrelin ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞【bāo】培养上【shàng】清或其它相关【guān】生物【wù】液体【tǐ】中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不【bú】用的板条【tiáo】应立【lì】即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取【qǔ】终止液和底【dǐ】物【wù】A、B液时，避免使用带金属部【bù】分的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标【biāo】准品【pǐn】：标准品的系【xì】列稀释应在实验时准备【bèi】，不【bú】能储存【cún】，稀释前【qián】将标准品振荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据【jù】待测样品数量加上标【biāo】准品的数【shù】量【liàng】决【jué】定所【suǒ】需的板条数，每个标准品和空【kōng】白孔【kǒng】建议做复孔。

5)每个样品根据自己的【de】数量来定，能使用【yòng】复【fù】孔的【de】尽量做复【fù】孔，标本【běn】用标本稀释液1:1稀【xī】释后加入50ul于【yú】反应孔【kǒng】内。

6)加入稀释好后的标【biāo】准【zhǔn】品【pǐn】50ul于反应孔、加入待测样品50ul于【yú】反【fǎn】应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去【qù】孔内液【yè】体，每【měi】孔加满洗涤液，振【zhèn】荡30秒，甩去洗【xǐ】涤液，用吸水纸拍干，重复此【cǐ】操作【zuò】3次。

9)每孔【kǒng】加入80ul的【de】亲【qīn】和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温【wēn】育30分钟。

10)甩去【qù】孔【kǒng】内液体，每孔加满洗涤液，振【zhèn】荡30秒，甩【shuǎi】去洗涤液，用【yòng】吸水【shuǐ】纸拍干。重复此操作3次。

11)每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟，避【bì】免【miǎn】光【guāng】照。

12)取出【chū】酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终【zhōng】止液【yè】后【hòu】应立即测定【dìng】结果【guǒ】。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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