小鼠 ROS ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称：小鼠 ROS ELISA试剂盒 （酶联免疫检测法）

英　文： ROS ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预【yù】期【qī】应用：ELISA法【fǎ】定量测定血【xuè】清、血浆、细胞培养上【shàng】清或其它相【xiàng】关生【shēng】物液体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不【bú】用的【de】板条应立即放回包装袋【dài】中，密封保存【cún】，以免变质【zhì】。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸【xī】取终止液【yè】和【hé】底物A、B液【yè】时，避免使用带金属部分的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标【biāo】准【zhǔn】品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存，稀释【shì】前将【jiāng】标准【zhǔn】品振【zhèn】荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测【cè】样【yàng】品数量加【jiā】上标准【zhǔn】品的数【shù】量决定所【suǒ】需的【de】板条数，每【měi】个标准品和空白孔建议做复孔。

5)每【měi】个样品根据自己的数量来定【dìng】，能使用复孔的【de】尽量做复孔，标本用标【biāo】本稀释液1:1稀释后加入【rù】50ul于反应【yīng】孔内【nèi】。

6)加【jiā】入稀释【shì】好【hǎo】后的标准品50ul于反应孔、加入【rù】待测【cè】样品50ul于反应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔【kǒng】内液体，每孔加满洗涤液，振荡【dàng】30秒，甩去洗【xǐ】涤液【yè】，用吸水纸拍【pāi】干，重复此操作3次【cì】。

9)每孔加入【rù】80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振【zhèn】荡混匀，37℃温育30分【fèn】钟。

10)甩去孔内液体【tǐ】，每孔【kǒng】加满【mǎn】洗涤【dí】液，振荡30秒，甩去【qù】洗涤液【yè】，用【yòng】吸水纸拍干。重复此操作3次。

11)每孔加入底物【wù】A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分【fèn】钟【zhōng】，避免【miǎn】光照。

12)取出酶标板【bǎn】，迅速加入【rù】50ul终止【zhǐ】液，加入终【zhōng】止液后应立即测定【dìng】结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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