小鼠 NF-kB ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称： 小鼠 NF-kB ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

英　文：NF-kB ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预【yù】期应用【yòng】：ELISA法定【dìng】量【liàng】测定血清、血浆【jiāng】、细胞培养上清或其它相关生物液体【tǐ】中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不用的板条应【yīng】立即放回【huí】包装【zhuāng】袋中【zhōng】，密【mì】封保存，以免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终止液和底物【wù】A、B液时，避【bì】免使用带【dài】金属【shǔ】部【bù】分的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准品：标准【zhǔn】品的【de】系列稀【xī】释应在实验时【shí】准备，不【bú】能储存，稀释前将标准【zhǔn】品振荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测样品数量加上标【biāo】准品【pǐn】的数【shù】量决【jué】定所需的板条数【shù】，每个标准【zhǔn】品【pǐn】和【hé】空白孔建议做复孔。

5)每个【gè】样品根据自己的数量来定，能使用复【fù】孔的尽量做【zuò】复孔【kǒng】，标本用标本稀释【shì】液1:1稀【xī】释【shì】后加入50ul于【yú】反应孔内。

6)加入稀释【shì】好后的标准品50ul于反【fǎn】应孔、加【jiā】入待测【cè】样【yàng】品50ul于反应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内【nèi】液体，每孔【kǒng】加满洗涤液，振【zhèn】荡30秒，甩去【qù】洗【xǐ】涤液【yè】，用吸水纸拍干，重复此【cǐ】操作3次。

9)每孔加入80ul的【de】亲和链酶素【sù】-HRP，轻轻【qīng】振荡混匀，37℃温育30分【fèn】钟。

10)甩去孔内液体，每孔加满【mǎn】洗涤液，振荡【dàng】30秒，甩【shuǎi】去洗涤液，用吸水纸【zhǐ】拍【pāi】干。重复此操作【zuò】3次。

11)每孔加【jiā】入底物A、B各50ul，轻轻振荡【dàng】混【hún】匀，37℃温育10分钟，避免光【guāng】照【zhào】。

12)取出酶标板，迅速加入【rù】50ul终止【zhǐ】液【yè】，加入终止液后应立即测定【dìng】结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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