小鼠 NF-KB 试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称： 小鼠 NF-KB 试剂盒（酶联免疫检测法）

英　文： NF-KB ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细【xì】胞【bāo】培养上清或其它【tā】相【xiàng】关生【shēng】物液体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实【shí】验中不用的板条应【yīng】立即【jí】放回包【bāo】装袋中，密封保存，以免变【biàn】质【zhì】。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终【zhōng】止【zhǐ】液【yè】和【hé】底物A、B液【yè】时，避免使用带金属部【bù】分的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准【zhǔn】品【pǐn】：标准品的系列稀释应在【zài】实验时准【zhǔn】备【bèi】，不能储存，稀【xī】释【shì】前将标准品振荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据【jù】待【dài】测样【yàng】品数量加【jiā】上标准品【pǐn】的数量决定所需的板条数，每个标准【zhǔn】品和空白孔建议【yì】做复孔【kǒng】。

5)每个样品【pǐn】根【gēn】据自己的数【shù】量【liàng】来定，能使用复孔的尽量做复孔【kǒng】，标本【běn】用【yòng】标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

6)加入稀释好后的标【biāo】准品50ul于反应孔、加【jiā】入【rù】待测样品50ul于【yú】反应孔内【nèi】。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩【shuǎi】去孔内液【yè】体，每孔加满【mǎn】洗涤液，振荡30秒，甩去【qù】洗涤液，用吸【xī】水纸拍干【gàn】，重复此操作【zuò】3次。

9)每【měi】孔加【jiā】入80ul的亲【qīn】和链酶素-HRP，轻轻振【zhèn】荡【dàng】混匀，37℃温【wēn】育30分钟。

10)甩【shuǎi】去孔内液【yè】体，每【měi】孔加满洗【xǐ】涤液，振荡30秒，甩去洗涤液【yè】，用吸水纸拍干。重【chóng】复此操作3次【cì】。

11)每孔【kǒng】加【jiā】入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温【wēn】育10分钟，避免光照。

12)取【qǔ】出酶标板，迅速加入50ul终止液，加【jiā】入终止液【yè】后应立即测【cè】定【dìng】结【jié】果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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