大鼠EMAIgA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠EMAIgA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试剂取出放置30分钟，平【píng】衡至室温，所有【yǒu】标准品和样品必需设【shè】置【zhì】平行对照【zhào】实验，快速【sù】加入试剂至样品中，立即【jí】漩涡震【zhèn】荡【dàng】2秒混匀【yún】。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸决定【dìng】酶【méi】标条的使用量，将剩余的酶标条【tiáo】连同干燥剂一起放回【huí】密封【fēng】塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶至各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工【gōng】作液【yè】至【zhì】各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于【yú】孔板【bǎn】振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔洗3次，每次需拍干【gàn】。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清【qīng】空各【gè】微孔【kǒng】，在干净的无尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数次，以确保【bǎo】没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底物溶液，于室【shì】温【wēn】静【jìng】置5~30分钟。（显色【sè】底物A和【hé】B需【xū】在临【lín】用前15分钟内【nèi】等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪【yí】Blank（空白）孔【kǒng】值，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之【zhī】间好有修正，如果【guǒ】酶标仪【yí】不能【néng】自动清除Blank(空【kōng】白)孔【kǒng】值，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试【shì】剂【jì】盒时，应【yīng】将各种试剂【jì】管离心数分钟，以【yǐ】便试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验留一孔作为【wéi】空【kōng】白调零【líng】孔【kǒng】，该孔不加任何【hé】试【shì】剂，只是【shì】zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸【zhēng】发，试验时【shí】将反应板放于【yú】铺有【yǒu】湿布的【de】密闭盒【hé】内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶标板或者试剂，请于【yú】9-23℃保存，标【biāo】准品、生物-素标记抗【kàng】体工作液、辣根过【guò】氧化物酶标记亲和素工作【zuò】液请依据所需的量配置【zhì】使用，请【qǐng】勿【wù】重复使【shǐ】用已稀释过的标【biāo】准品、生【shēng】物-素【sù】标【biāo】记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和【hé】素【sù】工【gōng】作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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