大鼠 AMA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 AMA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试【shì】剂取出放置30分【fèn】钟，平【píng】衡至室【shì】温，所有标准品【pǐn】和样品必需设置平行【háng】对照实验，快速【sù】加入试剂【jì】至样品中，立即漩【xuán】涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实【shí】验键盘纸决定酶标条的使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放【fàng】回【huí】密封【fēng】塑料【liào】袋【dài】，密封【fēng】，4℃保存【cún】。

2. 移取【qǔ】50μL中和液【yè】至【zhì】各个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异【yì】结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结【jié】合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至【zhì】各【gè】孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时【shí】。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干微【wēi】孔内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需拍干。

11. 后一次洗涤【dí】，清空各微孔，在【zài】干净的无尘吸水【shuǐ】纸上【shàng】轻巧酶标板数次，以确【què】保没有【yǒu】洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶【róng】液【yè】，于室【shì】温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在临用前15分钟内等体【tǐ】积混合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的光密【mì】度值，在【zài】570nm至【zhì】590nm之间好有【yǒu】修正，如果酶标仪不能自【zì】动清除Blank(空【kōng】白)孔值，那么手动扣除每个读【dú】数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试剂盒【hé】时，应将各种试剂【jì】管离心数【shù】分钟，以便试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验【yàn】留一孔作为空白调零孔【kǒng】，该孔不【bú】加任何试剂，只【zhī】是【shì】zui后加底物【wù】溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用【yòng】此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸【zhēng】发，试验时【shí】将【jiāng】反应板放于铺有【yǒu】湿布的密【mì】闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的【de】酶标板或者【zhě】试【shì】剂，请于9-23℃保存，标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标【biāo】记抗体工作液、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素【sù】工【gōng】作液请依据所【suǒ】需的量配置使用，请【qǐng】勿重复使用已稀【xī】释过的标准品、生物-素【sù】标记抗体工作液或【huò】、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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