大鼠 u-T4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 u-T4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂取出放置【zhì】30分钟【zhōng】，平衡【héng】至室温，所【suǒ】有标【biāo】准品和样品必需设【shè】置【zhì】平【píng】行对照【zhào】实验，快速加【jiā】入试剂至样【yàng】品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实验键盘【pán】纸决定酶【méi】标条的使用量，将剩余【yú】的酶标条连【lián】同干【gàn】燥剂一【yī】起【qǐ】放回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至各个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工【gōng】作液至各孔中，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸【zhǐ】上拍干【gàn】微孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后【hòu】一次【cì】洗涤，清空各微孔，在干净的无尘【chén】吸水【shuǐ】纸上【shàng】轻巧酶标板数次，以【yǐ】确保没有【yǒu】洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底【dǐ】物溶液，于室温【wēn】静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需在【zài】临用前【qián】15分钟【zhōng】内等体积混合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处【chù】的光密【mì】度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶【méi】标【biāo】仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣【kòu】除每个读数的Blank（空【kōng】白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使用试剂盒【hé】时，应将各种试剂管【guǎn】离心【xīn】数分钟，以便试【shì】剂集中到【dào】管底。

2. 每次实验留一【yī】孔作为空白【bái】调零孔，该孔【kǒng】不加任何试剂，只【zhī】是zui后加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用【yòng】此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验时【shí】将反应板【bǎn】放于【yú】铺有湿布的密闭盒内，酶标板加【jiā】上盖或覆膜【mó】。

4. 未使用【yòng】完【wán】的【de】酶【méi】标板或者试剂，请于9-23℃保存，标准品【pǐn】、生物-素标记抗体工作液【yè】、辣【là】根过氧化【huà】物【wù】酶标记亲和素【sù】工作液请依据所需的量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准品、生【shēng】物【wù】-素标【biāo】记【jì】抗体工作液或、辣根过【guò】氧化物酶标记【jì】亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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