大鼠 β2GP1IgA 试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 β2GP1IgA ELISA试剂盒（酶联检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置【zhì】30分钟，平衡【héng】至【zhì】室温，所有标准品和样品必需设置平【píng】行对照【zhào】实验，快【kuài】速【sù】加入试【shì】剂至样品【pǐn】中，立即【jí】漩涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸决定【dìng】酶标条的使用量，将剩余【yú】的酶标条连【lián】同干燥【zào】剂一起放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存【cún】。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至【zhì】各个微孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结【jié】合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶【méi】至【zhì】各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取【qǔ】50μL 抗体工作【zuò】液至【zhì】各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特【tè】异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔置于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干【gàn】微【wēi】孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需【xū】拍干。

11. 后一次【cì】洗【xǐ】涤，清空各微【wēi】孔，在干净的无尘吸水纸【zhǐ】上【shàng】轻巧酶【méi】标板数次，以【yǐ】确保没有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色【sè】底物溶液，于室【shì】温静【jìng】置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需在【zài】临用前15分【fèn】钟内等体积【jī】混合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值【zhí】，读取【qǔ】450nm处的光密度值，在570nm至【zhì】590nm之间好有修正，如【rú】果酶标仪【yí】不能【néng】自动清除【chú】Blank(空【kōng】白)孔值【zhí】，那么手动扣除每个读数的【de】Blank（空白）孔光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使【shǐ】用试剂盒时，应将各【gè】种试剂管离心【xīn】数分钟，以便试【shì】剂集中到【dào】管底。

2. 每次实验【yàn】留一孔【kǒng】作为空白调【diào】零孔，该孔不加任何【hé】试剂，只【zhī】是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔【kǒng】调OD值【zhí】至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试【shì】验时将反【fǎn】应板放于铺有湿布的密【mì】闭盒内，酶标板加【jiā】上盖或【huò】覆膜。

4. 未使【shǐ】用【yòng】完的酶标板或者试剂，请于9-23℃保存，标准品【pǐn】、生物-素标记【jì】抗体工作液【yè】、辣根过氧化【huà】物【wù】酶标记亲和【hé】素工作液请依据【jù】所【suǒ】需的量配置使用，请勿【wù】重【chóng】复使用已稀释过的标准品、生物-素标记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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