大鼠 HD ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 HD ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种【zhǒng】试剂取出放置30分钟，平衡至【zhì】室【shì】温，所【suǒ】有标准品和样品必【bì】需设置平【píng】行对照【zhào】实验，快速加入试剂至样品中【zhōng】，立即【jí】漩涡震【zhèn】荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实验键盘纸决【jué】定酶标【biāo】条【tiáo】的使用量【liàng】，将剩余【yú】的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑【sù】料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结【jié】合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室温孵育【yù】2小时【shí】。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干【gàn】微孔【kǒng】内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一【yī】次洗涤，清【qīng】空各微孔，在【zài】干净的无尘吸水【shuǐ】纸上轻巧酶标板数次【cì】，以确保没有洗【xǐ】涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液【yè】，于室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需在临用【yòng】前15分钟内等【děng】体积【jī】混合【hé】，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间【jiān】好有修正【zhèng】，如果酶标【biāo】仪【yí】不【bú】能自动【dòng】清除Blank(空白)孔值，那【nà】么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光【guāng】密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试剂盒时【shí】，应将【jiāng】各种【zhǒng】试剂【jì】管离心数【shù】分钟，以便试【shì】剂集中到管底。

2. 每次实【shí】验留一孔【kǒng】作为空白调零孔，该孔不加任何【hé】试剂【jì】，只是【shì】zui后加【jiā】底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用【yòng】此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发，试验【yàn】时将反应板放【fàng】于铺有湿【shī】布的【de】密闭盒内【nèi】，酶标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使用完的【de】酶标板或者试剂【jì】，请于9-22℃保存【cún】，标【biāo】准品【pǐn】、生物-素【sù】标【biāo】记抗体工作液、辣根【gēn】过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液请依据所需【xū】的量配置使用，请勿【wù】重复使用【yòng】已稀释过的【de】标准品、生物【wù】-素标记抗体【tǐ】工【gōng】作液【yè】或、辣根过【guò】氧【yǎng】化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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