大鼠 MCAb ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MCAb ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试剂【jì】取出放置30分【fèn】钟，平衡至室温，所有标准品和样品必需设置平【píng】行对照【zhào】实【shí】验，快速加【jiā】入试剂至【zhì】样品中，立【lì】即漩涡震荡【dàng】2秒混【hún】匀。

1. 依据实验【yàn】键【jiàn】盘纸决定酶标条的【de】使用量，将剩【shèng】余的酶标条连同干【gàn】燥剂一起放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至各个【gè】微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合【hé】)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶【méi】至【zhì】各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干【gàn】微孔内溶【róng】液，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次需拍干。

11. 后一次【cì】洗涤，清空各微孔，在【zài】干净的无【wú】尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数次，以【yǐ】确保没【méi】有【yǒu】洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶【róng】液，于室温静置5~30分钟。（显色【sè】底物【wù】A和B需【xū】在临用前15分钟内等体积混合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白【bái】）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之【zhī】间【jiān】好有修正，如果【guǒ】酶【méi】标仪【yí】不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光【guāng】密度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒【hé】时，应将各种试【shì】剂管离心数分钟【zhōng】，以便【biàn】试【shì】剂集中到【dào】管底。

2. 每【měi】次实验留一【yī】孔作为空白调零孔，该孔不加任何【hé】试剂，只【zhī】是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此【cǐ】孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试验【yàn】时将反【fǎn】应板放于铺有湿布的密闭【bì】盒内【nèi】，酶标板【bǎn】加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标【biāo】板或者试剂，请【qǐng】于9-22℃保存，标准【zhǔn】品【pǐn】、生【shēng】物-素标记抗体工【gōng】作液、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲和素工作液【yè】请依据所需的量配【pèi】置使用，请勿重复使【shǐ】用已稀释过的标准【zhǔn】品、生物-素【sù】标【biāo】记【jì】抗【kàng】体工作液【yè】或、辣根【gēn】过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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