大鼠 Cr ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 Cr ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试剂取出放置30分钟【zhōng】，平【píng】衡至室温【wēn】，所有【yǒu】标【biāo】准品和样品必需【xū】设置平行【háng】对【duì】照实验【yàn】，快速加入试剂至样品【pǐn】中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸【zhǐ】决定酶标【biāo】条的使【shǐ】用量【liàng】，将剩余【yú】的酶标条连同干【gàn】燥剂【jì】一起放回密【mì】封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔中，除了【le】TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至各孔中，除【chú】了【le】TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移【yí】取【qǔ】50μL 抗体工作液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔。

9. 将酶【méi】标【biāo】孔【kǒng】置于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时。

10. 在吸水纸上拍干微【wēi】孔内【nèi】溶液【yè】，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次需拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微孔，在干【gàn】净的无【wú】尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶【méi】标板数次，以确保没有【yǒu】洗涤液【yè】残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物A和B需在临用【yòng】前15分【fèn】钟内等【děng】体积【jī】混合，并避【bì】光【guāng】放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值，读【dú】取450nm处的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标【biāo】仪【yí】不能自【zì】动清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手动扣除【chú】每个读数的Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试【shì】剂盒时，应【yīng】将各种试剂【jì】管离【lí】心数分钟，以便试剂集中到【dào】管底【dǐ】。

2. 每次实验留一孔作为空【kōng】白调零【líng】孔，该孔不加任何试剂，只【zhī】是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量【liàng】时先用此孔【kǒng】调OD值【zhí】至零【líng】。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺【pù】有【yǒu】湿布【bù】的密闭盒内，酶【méi】标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶【méi】标板或者【zhě】试剂，请于9-22℃保存【cún】，标准品、生物-素标记抗体工作【zuò】液、辣根过氧化物【wù】酶标记【jì】亲【qīn】和素【sù】工【gōng】作液请【qǐng】依据所需的量【liàng】配【pèi】置使用，请勿重复【fù】使用已稀释过的标准品、生物【wù】-素标记【jì】抗体工【gōng】作液【yè】或、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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