大鼠 PY ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 PY ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂取出放置30分钟【zhōng】，平衡至室温【wēn】，所有标准品和样品必需设置平行【háng】对【duì】照实验，快【kuài】速加入试剂【jì】至样品中【zhōng】，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定【dìng】酶标条的使用量，将剩余的酶标条连同干【gàn】燥剂一【yī】起放【fàng】回【huí】密封塑料袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异【yì】结【jié】合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室【shì】温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶【róng】液，加【jiā】洗涤液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次需【xū】拍干【gàn】。

11. 后一【yī】次洗涤，清空各微孔，在干【gàn】净的无尘吸【xī】水纸上【shàng】轻巧酶标板数次【cì】，以【yǐ】确保没有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室【shì】温静【jìng】置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和【hé】B需在【zài】临用前15分钟内等体【tǐ】积【jī】混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪【yí】Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正【zhèng】，如果【guǒ】酶标仪不能自动清【qīng】除Blank(空白)孔值，那么手动扣【kòu】除每个读数的Blank（空白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使【shǐ】用【yòng】试【shì】剂【jì】盒时【shí】，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到【dào】管底。

2. 每【měi】次实验留【liú】一孔作为空白【bái】调【diào】零孔【kǒng】，该孔不加任何试剂，只是zui后加底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔【kǒng】调OD值至零【líng】。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验时将反【fǎn】应板放【fàng】于铺有【yǒu】湿【shī】布的密闭【bì】盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者试剂，请于【yú】9-22℃保存，标准品、生物-素标记抗【kàng】体【tǐ】工作液、辣根过氧化【huà】物【wù】酶标记亲和素工作液请依据所需【xū】的【de】量配置使用，请勿【wù】重【chóng】复【fù】使用已稀释过的标准品【pǐn】、生物-素标记抗【kàng】体工作【zuò】液【yè】或【huò】、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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