大鼠DHEAS7 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 DHEAS7 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各【gè】种试剂取出【chū】放置30分钟，平衡至室温，所有标准品和【hé】样【yàng】品必需【xū】设置平行对照实【shí】验【yàn】，快速加入试剂【jì】至样品中，立【lì】即漩涡震荡【dàng】2秒【miǎo】混匀。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定酶标条的使用量，将剩余的【de】酶标条连同干【gàn】燥剂【jì】一起放回【huí】密封塑料袋，密封【fēng】，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中【zhōng】和【hé】液至各【gè】个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔中，除了【le】TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作【zuò】液至【zhì】各【gè】孔中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特【tè】异结【jié】合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔板【bǎn】振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上拍干微孔内【nèi】溶液【yè】，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在【zài】干【gàn】净的【de】无尘吸【xī】水【shuǐ】纸上【shàng】轻巧酶标板数次，以确保没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物【wù】溶液，于室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需【xū】在【zài】临用前15分钟内【nèi】等体积混合【hé】，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在570nm至【zhì】590nm之间好【hǎo】有修正，如果【guǒ】酶标仪不能【néng】自动【dòng】清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个【gè】读【dú】数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初【chū】次使用试剂盒时【shí】，应将【jiāng】各种试剂管离心【xīn】数分钟，以便试剂集【jí】中到管底。

2. 每【měi】次实验【yàn】留一【yī】孔作为空白调零孔【kǒng】，该孔不加任【rèn】何试剂，只是zui后加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用【yòng】此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为防止样品【pǐn】蒸发【fā】，试验时将反应板放于铺【pù】有湿布的【de】密闭盒内【nèi】，酶标【biāo】板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用完的酶标板或者试剂【jì】，请于9-22℃保存，标准品、生物-素标记抗体工作液、辣根【gēn】过【guò】氧化物酶标记【jì】亲和素【sù】工作液【yè】请【qǐng】依【yī】据所需的【de】量配置使用，请勿重复使【shǐ】用已稀释过【guò】的标准品【pǐn】、生物-素标记抗体工作【zuò】液或、辣根过氧【yǎng】化物酶【méi】标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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