大鼠 IVIgG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IVIgG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试剂取出放【fàng】置30分钟，平衡至室温，所有标准品和样【yàng】品必【bì】需设置平【píng】行【háng】对照实验，快速加入【rù】试剂至【zhì】样品中【zhōng】，立【lì】即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实验键【jiàn】盘纸决定酶标条【tiáo】的【de】使用量，将剩余【yú】的酶标条【tiáo】连同【tóng】干燥剂一起【qǐ】放回密【mì】封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至各【gè】个微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体【tǐ】工【gōng】作液【yè】至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置【zhì】于孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时【shí】。

10. 在【zài】吸水纸上拍干【gàn】微孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次【cì】，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干【gàn】净的【de】无【wú】尘吸水【shuǐ】纸上【shàng】轻巧酶标板数次，以确保没【méi】有洗涤液【yè】残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟。（显色【sè】底【dǐ】物A和B需【xū】在【zài】临【lín】用前15分钟内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空白）孔【kǒng】值【zhí】，读取450nm处的【de】光密度【dù】值【zhí】，在570nm至590nm之间【jiān】好有【yǒu】修正【zhèng】，如果酶标仪不【bú】能自动清除Blank(空白【bái】)孔值，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试剂盒时【shí】，应将各种【zhǒng】试剂【jì】管离心数分【fèn】钟，以便试【shì】剂集中到【dào】管底。

2. 每次实验留【liú】一【yī】孔作为空白调零孔，该【gāi】孔不【bú】加【jiā】任何试剂，只是【shì】zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量【liàng】时先用此孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防【fáng】止【zhǐ】样品蒸发，试验【yàn】时将反应板放于【yú】铺有湿布的密【mì】闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者试剂，请于【yú】9-22℃保存，标准【zhǔn】品、生物-素标记【jì】抗体工作【zuò】液、辣根过【guò】氧【yǎng】化物【wù】酶标记亲和素工作液【yè】请依据所需【xū】的量配置使用，请【qǐng】勿重复使用已稀释过的标准品、生【shēng】物-素标记抗体工【gōng】作液或、辣根【gēn】过氧化【huà】物酶标记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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