大鼠 MMP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MMP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂【jì】取出放【fàng】置【zhì】30分钟，平【píng】衡至【zhì】室温，所有标【biāo】准品和【hé】样品【pǐn】必需设置平行对照实验，快速加入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸决定酶标条【tiáo】的【de】使用【yòng】量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封【fēng】塑料袋，密【mì】封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个【gè】微孔中【zhōng】，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔【kǒng】和【hé】B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶【méi】至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作液至【zhì】各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结【jié】合【hé】）孔。

9. 将【jiāng】酶【méi】标孔置于孔板【bǎn】振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每孔【kǒng】洗3次【cì】，每次需拍干【gàn】。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净的无【wú】尘吸【xī】水纸上轻巧酶【méi】标板数【shù】次【cì】，以确保没有洗涤【dí】液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物【wù】溶液，于【yú】室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需在【zài】临用前15分钟【zhōng】内等体积【jī】混合，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处【chù】的【de】光密度值，在570nm至590nm之间好有修正【zhèng】，如果酶标仪不能自【zì】动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手【shǒu】动扣除每个读数的Blank（空白【bái】）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使【shǐ】用试剂盒【hé】时【shí】，应将各种试【shì】剂管离心数分钟，以【yǐ】便试【shì】剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔【kǒng】作为【wéi】空白调零孔【kǒng】，该孔不加任何试剂【jì】，只是zui后加底【dǐ】物【wù】溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用【yòng】此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时【shí】将【jiāng】反【fǎn】应板放于铺【pù】有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或覆【fù】膜。

4. 未使用完的酶标【biāo】板或者试剂，请于9-21℃保存，标准品、生物【wù】-素标【biāo】记【jì】抗体【tǐ】工作液、辣【là】根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液请【qǐng】依据所需的量【liàng】配置使用，请勿【wù】重复使用【yòng】已稀释【shì】过的标准品、生物【wù】-素标记抗体工作液或【huò】、辣根过氧化物酶【méi】标记亲和【hé】素工【gōng】作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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