产品时间:2024-9-21
大鼠 MMP-4 ELISA试【shì】剂盒(酶联免疫检【jiǎn】测法)由上海酶联生【shēng】物【wù】提供,包括MMP-4 ELISA试剂【jì】盒说【shuō】明书【shū】,酶联免【miǎn】疫检测试剂盒免【miǎn】费代测等产品详细介绍。
中文名称:大鼠 MMP-4 ELISA试剂盒(酶联免疫检测法)
产品规格:48T/96
产品存储:低温、避光保存
产品库存:现货供应
产品分类:酶联免疫试剂盒
产品用途:仅供检测,不得用于临床
发货方式:专门快递免费送货上门
实验步骤:
使用前将【jiāng】各种试【shì】剂取出放置【zhì】30分【fèn】钟,平衡至室温,所有标【biāo】准品和样品【pǐn】必【bì】需设置平行对照【zhào】实验,快速加入试剂至样品中,立即漩涡【wō】震荡2秒【miǎo】混匀【yún】。
1. 依【yī】据实验键【jiàn】盘纸决定酶标条【tiáo】的使用量,将剩余的【de】酶标条连同干燥剂【jì】一【yī】起放回密封塑料【liào】袋,密封,4℃保存。
2. 移取【qǔ】50μL中和液至各个微孔中,除了【le】TA(全活性)孔和Blank(空白【bái】)孔【kǒng】。
3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔(0 pmol/mL cAMP标准品)。
4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。
5. 移取100μL样品至相应的孔。
6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非【fēi】特异结合)孔【kǒng】。
7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各孔中,除了TA(全活性【xìng】)孔和Blank(空白)孔。
8. 移取50μL 抗体工【gōng】作液至各孔中,除了【le】TA(全活性)孔、Blank(空白)孔【kǒng】和NSB(非特异【yì】结合)孔。
9. 将酶标孔置【zhì】于孔板振动器上,250~500rpm,室温【wēn】孵育2小【xiǎo】时。
10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液,加洗【xǐ】涤【dí】液400μL每【měi】孔【kǒng】洗3次【cì】,每次需拍干【gàn】。
11. 后一次洗【xǐ】涤,清空各微孔,在干【gàn】净的无尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶【méi】标板数次,以【yǐ】确保没有【yǒu】洗涤液【yè】残留。
12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。
13. 每孔200μL显色【sè】底物溶液,于室温静置5~30分钟。(显【xiǎn】色底物【wù】A和B需在临用前15分钟内等体积混【hún】合,并【bìng】避光【guāng】放置)。
14. 每孔加入50μL终止液,终止后立即读数。
15. 清除酶标仪【yí】Blank(空白)孔值,读取450nm处的【de】光密度值,在570nm至590nm之间好有修正,如果酶标【biāo】仪不能自动清【qīng】除Blank(空白)孔值,那【nà】么手【shǒu】动扣除【chú】每【měi】个读【dú】数的Blank(空白)孔光密度值【zhí】。
注意事项:
1. 用户在初次使用试剂盒时【shí】,应将【jiāng】各种【zhǒng】试剂管离心数分钟【zhōng】,以便试剂集中到【dào】管【guǎn】底。
2. 每次【cì】实验留【liú】一孔作为空白调零孔,该孔不加【jiā】任【rèn】何试剂,只是zui后加底【dǐ】物溶【róng】液及【jí】2N H2SO4,测量时先用此【cǐ】孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发【fā】,试验时将【jiāng】反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加【jiā】上盖或覆【fù】膜【mó】。
4. 未使用完的【de】酶标板或【huò】者【zhě】试【shì】剂【jì】,请于【yú】9-21℃保存,标准品、生【shēng】物-素标记抗体工作液、辣【là】根过氧化物酶【méi】标记【jì】亲和素【sù】工作液请【qǐng】依据所需的量配置【zhì】使【shǐ】用,请勿【wù】重复使用已稀释过的标准品、生物-素标记抗【kàng】体【tǐ】工作液或、辣根过氧化物酶【méi】标记亲和【hé】素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
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