大鼠 ICAM3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ICAM3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放【fàng】置30分钟【zhōng】，平衡至室【shì】温，所【suǒ】有标准【zhǔn】品【pǐn】和样品必需设置【zhì】平【píng】行对照【zhào】实验，快速加入试剂至样品【pǐn】中，立即漩涡震荡2秒混【hún】匀。

1. 依据【jù】实验键盘纸【zhǐ】决定酶标条的使用【yòng】量，将剩余的酶【méi】标【biāo】条连同【tóng】干燥剂【jì】一起【qǐ】放回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异【yì】结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至【zhì】各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至【zhì】各【gè】孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异【yì】结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔【kǒng】板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在【zài】吸水纸上拍干微孔内【nèi】溶液【yè】，加洗涤【dí】液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清【qīng】空各微孔【kǒng】，在干净的无【wú】尘吸水纸上轻巧酶标板数次，以【yǐ】确【què】保没【méi】有洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温静置【zhì】5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需在临【lín】用前【qián】15分钟内等体积混合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度【dù】值，在570nm至590nm之间【jiān】好有修正【zhèng】，如果酶标仪不能【néng】自动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动【dòng】扣除每个读数【shù】的Blank（空白）孔光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用户【hù】在【zài】初【chū】次使用试剂盒时，应将各种试剂【jì】管离心数分钟，以【yǐ】便试【shì】剂集中到管底。

2. 每次实验【yàn】留一孔作为【wéi】空【kōng】白调零孔，该孔不加【jiā】任何试剂，只是zui后加【jiā】底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调【diào】OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的【de】密闭盒内【nèi】，酶【méi】标板加【jiā】上盖或覆【fù】膜。

4. 未使用完的【de】酶标板【bǎn】或者试剂，请于9-21℃保存，标准【zhǔn】品、生物-素标【biāo】记抗体工【gōng】作液【yè】、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和【hé】素工作液请依据所需的【de】量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标【biāo】准品、生物-素标【biāo】记【jì】抗体【tǐ】工【gōng】作液或、辣【là】根【gēn】过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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