大鼠 MIP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MIP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置30分钟【zhōng】，平【píng】衡至【zhì】室温【wēn】，所有标准品和样品【pǐn】必需【xū】设置平行对照实验，快速加【jiā】入【rù】试剂至样品中，立【lì】即漩涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据实验【yàn】键盘纸决【jué】定酶【méi】标条的使【shǐ】用量【liàng】，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑料袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存【cún】。

2. 移取50μL中和液至各个微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取【qǔ】50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至【zhì】各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白【bái】）孔【kǒng】和NSB（非特异【yì】结合【hé】）孔。

9. 将酶标【biāo】孔【kǒng】置于孔板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上拍【pāi】干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需【xū】拍干。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空各【gè】微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板【bǎn】数【shù】次，以确保没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室【shì】温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和【hé】B需在临用前15分【fèn】钟内等【děng】体【tǐ】积混合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空【kōng】白【bái】）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间【jiān】好【hǎo】有修正，如果酶标仪不【bú】能自动清【qīng】除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读数【shù】的【de】Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心【xīn】数分【fèn】钟【zhōng】，以【yǐ】便试剂集中【zhōng】到【dào】管底【dǐ】。

2. 每次【cì】实验留一孔作【zuò】为【wéi】空白【bái】调零孔，该【gāi】孔不加【jiā】任何【hé】试剂，只是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为【wéi】防止【zhǐ】样品蒸发，试验【yàn】时将反【fǎn】应【yīng】板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶【méi】标板【bǎn】或者试【shì】剂，请于9-21℃保存，标准品、生物-素标记抗体工【gōng】作液、辣【là】根过氧【yǎng】化物酶标记亲和【hé】素工作液请依据所【suǒ】需的量配【pèi】置【zhì】使【shǐ】用，请勿重复使用【yòng】已稀释过的【de】标准品、生物-素标记抗体工作【zuò】液或、辣根过氧【yǎng】化物酶标记【jì】亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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