马红球菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：马红球菌PCR检测试剂盒

英文名称：Rhodococcus equiPCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品【pǐn】）： 2瓶，请临用前【qián】15分钟内配制【zhì】。每【měi】瓶以样【yàng】品稀释液【yè】稀释至0.5ml，盖好后室温【wēn】静置大约10分钟，同时反【fǎn】复颠【diān】倒【dǎo】/搓动以助溶解【jiě】，其浓度【dù】为200 U/L，然后【hòu】做系【xì】列倍比稀释【shì】（注：不【bú】要直接在【zài】板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作【zuò】为空白孔 0 U/L。如配【pèi】制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于【yú】0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品【pǐn】稀释【shì】液的Eppendorf管中【zhōng】，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；

2、马红球菌PCR检测试剂盒存放：样本在2~8℃条件下【xià】保【bǎo】存【cún】应不【bú】超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避【bì】免反复【fù】冻融【róng】（zui多冻融3次【cì】）；

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特异性：所有【yǒu】产品使用【yòng】的【de】引物均【jun1】经过详尽的生物信息学分析，经【jīng】过GenBank及自【zì】建庞大【dà】数据库的比对，确【què】保所用【yòng】的每一【yī】条引物均【jun1】为种属【shǔ】或血清【qīng】型【xíng】特异的基因序列区段【duàn】，可实现对种属及血清型的特异【yì】检测，特异性均达到【dào】100%。

2.重现性：该系列所【suǒ】有产品均【jun1】经【jīng】过大量实验【yàn】菌株的验证，重现性为100%。

3.灵敏性【xìng】：该【gāi】系列产品可实【shí】现对检测菌的高灵敏检测【cè】，当样【yàng】品中的浓度达到【dào】103cfu/ml时【shí】，可实现【xiàn】对其的直接检测【cè】，无需繁琐的增菌过程。

4.实用性：检测【cè】范围广，涵盖了对人体危害较为【wéi】严重的17种呼吸道【dào】及【jí】肠道致病菌，可实现对【duì】临床样品及其他【tā】环境取【qǔ】样【yàng】的快速检【jiǎn】测，整个检测过程为【wéi】9-22个小时【shí】。

5.优【yōu】势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公【gōng】司还进行了大量菌株的序列破译，从【cóng】理论上保证所选【xuǎn】引物【wù】具有【yǒu】良好的保守【shǒu】性和特异性【xìng】。

6.优势2：该系列试剂【jì】盒均经过大量的保守性及【jí】特异性实验【yàn】验证【zhèng】，凭借公司拥有【yǒu】的丰【fēng】富【fù】的菌种资【zī】源【yuán】，每一种检【jiǎn】测试剂盒均【jun1】经过了20余种标准菌【jun1】株和【hé】临床菌株【zhū】的保守【shǒu】性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程【chéng】中不会出现任【rèn】何的【de】假阳性【xìng】及【jí】假【jiǎ】阴性报告【gào】结果。

使用方法：

注：所【suǒ】有试剂【jì】使用前【qián】需*解冻【dòng】，混合均匀，6,000rpm离心数秒【miǎo】后【hòu】使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的【de】核酸提取可采【cǎi】用病毒RNA提取【qǔ】试剂盒或自【zì】动化【huà】核酸提取仪等，具体提取【qǔ】方【fāng】法请参照相关说明书；阳性质控【kòng】品及【jí】阴性【xìng】质【zhì】控品无需提取，可直【zhí】接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性【xìng】质【zhì】控【kòng】品）PCR反应管，每管分别加【jiā】入FMD RT-PCR反【fǎn】应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根【gēn】据【jù】每头份用【yòng】量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需【xū】总量【liàng】，两者混【hún】匀离心后分装【zhuāng】20 μl至单个PCR反应管)。组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离【lí】心【xīn】30s，转移至【zhì】样【yàng】本处理区。

2.马红球菌PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管【guǎn】中分【fèn】别加入待检样本RNA提取物、阴性【xìng】质控品和阳性【xìng】质控品各5 μl，盖【gài】紧【jǐn】管盖，于6,000rpm离心【xīn】10s，转移至扩增区。